CAJ | 학술논문

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别.方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位.采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组PⅢ.分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组PⅢ免疫杂交反应性.结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位.经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段.各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达.各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其Western Blot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定.结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位.共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位.差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象.
목적:예측급사선문호구단라선체(간칭구체)속특이성외막단백LipL41유효T화B세포(T/B)연합표위,료해불동기인형LipL41s차이T/B연합표위적면역반응성차별.방법:채용생물신식학방법예측LipL41/1화LipL41/2분자중T/B연합표위.채용PCR확증후선T/B연합표위편단,채용서균체전시급SDS-PAGE등기술획득함불동T/B연합표위적중조PⅢ.분별이rLipL41/1화rLipL41/2항혈청、황달출혈군뢰형뢰주전균항혈청화구체환자혈청위일항,채용Western Blot검측각항혈청여각중조PⅢ면역잡교반응성.결과:근거예측결과선택료LipL41s중8개공유혹차이T/B연합표위.경PCR확증획득료상술T/B연합표위편단.각T/B연합표위편단균준학삽입서균체PⅢ단백N단병유효표체.각항혈청균능식별상술8개T/B연합표위,단기Western Blot잡교신호강도존재차이,기중공유T/B연합표위LipL41/1-30화LipL41/1-233여불동항혈청적신호교강차은정.결론:소선택적8개T/B연합표위균위LipL41적유효항원표위.공유T/B연합표위LipL41/1-30화LipL41/1-233가작위구체MAP역묘적수선항원표위.차이T/B연합표위LipL41s-89화LipL41s-299여불동항혈청유면역교차현상.