中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2008年
12期
1470-1475
,共6页
丰干钧%刘浩%陈晓禾%李秀群%赵献峰%梁涛
豐榦鈞%劉浩%陳曉禾%李秀群%趙獻峰%樑濤
봉간균%류호%진효화%리수군%조헌봉%량도
椎间盘组织工程%hBMSCs%诱导分化%BMP-7%TGF-β3%软骨形成
椎間盤組織工程%hBMSCs%誘導分化%BMP-7%TGF-β3%軟骨形成
추간반조직공정%hBMSCs%유도분화%BMP-7%TGF-β3%연골형성
目的 探讨人椎间盘细胞和关节软骨细胞的分子表型差异,分析hBMSCs经TGF-β,和BMP-7联合诱导后能否分化为软骨细胞和髓核细胞.方法 取9例自愿捐赠者髂嵴骨髓20～40 mL分离培养hBMSCs.取第4代hBMSCs行三维微球培养.根据基础培养基中加入的生长因子不同,实验分成4组,分别为加入10 ng/mL TGF-β3组(A组)、200 ng/mL BMP-7组(B组)、同时加入两种生长因子组(C组)以及空白对照组(D组).于培养后21 d,行组织学及免疫组织化学观察:于培养后4、21 d进行PCR检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型胶原、蛋白多糖和SOX9基因的表达.结果 培养后21 d,HE染色示A组和C组细胞呈软骨细胞样形态特征,甲苯胺蓝染色及免疫组织化学染色Ⅱ型胶原表达呈阳性.B组和D组细胞形态无明显改变,PCR检测示培养后21 d,A、C组SOX9、蛋白多糖、Ⅰ型胶原及Ⅱ型胶原表达较4 d时明显增加(P＜0.05).B、D组Ⅰ型胶原表达较4d时明显增加(P＜0.05),SOX9、蛋白多糖及Ⅱ犁胶原较4d时无明显变化(P＞0.05).其中仅A组X型胶原表达呈阳性.结论 TGF-β,和BMP-7联合应用能促进hBMSCs分化更接近于椎间盘细胞,可能为椎间盘组织工程提供种子细胞.
目的 探討人椎間盤細胞和關節軟骨細胞的分子錶型差異,分析hBMSCs經TGF-β,和BMP-7聯閤誘導後能否分化為軟骨細胞和髓覈細胞.方法 取9例自願捐贈者髂嵴骨髓20～40 mL分離培養hBMSCs.取第4代hBMSCs行三維微毬培養.根據基礎培養基中加入的生長因子不同,實驗分成4組,分彆為加入10 ng/mL TGF-β3組(A組)、200 ng/mL BMP-7組(B組)、同時加入兩種生長因子組(C組)以及空白對照組(D組).于培養後21 d,行組織學及免疫組織化學觀察:于培養後4、21 d進行PCR檢測Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型膠原、蛋白多糖和SOX9基因的錶達.結果 培養後21 d,HE染色示A組和C組細胞呈軟骨細胞樣形態特徵,甲苯胺藍染色及免疫組織化學染色Ⅱ型膠原錶達呈暘性.B組和D組細胞形態無明顯改變,PCR檢測示培養後21 d,A、C組SOX9、蛋白多糖、Ⅰ型膠原及Ⅱ型膠原錶達較4 d時明顯增加(P＜0.05).B、D組Ⅰ型膠原錶達較4d時明顯增加(P＜0.05),SOX9、蛋白多糖及Ⅱ犛膠原較4d時無明顯變化(P＞0.05).其中僅A組X型膠原錶達呈暘性.結論 TGF-β,和BMP-7聯閤應用能促進hBMSCs分化更接近于椎間盤細胞,可能為椎間盤組織工程提供種子細胞.
목적 탐토인추간반세포화관절연골세포적분자표형차이,분석hBMSCs경TGF-β,화BMP-7연합유도후능부분화위연골세포화수핵세포.방법 취9례자원연증자가척골수20～40 mL분리배양hBMSCs.취제4대hBMSCs행삼유미구배양.근거기출배양기중가입적생장인자불동,실험분성4조,분별위가입10 ng/mL TGF-β3조(A조)、200 ng/mL BMP-7조(B조)、동시가입량충생장인자조(C조)이급공백대조조(D조).우배양후21 d,행조직학급면역조직화학관찰:우배양후4、21 d진행PCR검측Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ형효원、단백다당화SOX9기인적표체.결과 배양후21 d,HE염색시A조화C조세포정연골세포양형태특정,갑분알람염색급면역조직화학염색Ⅱ형효원표체정양성.B조화D조세포형태무명현개변,PCR검측시배양후21 d,A、C조SOX9、단백다당、Ⅰ형효원급Ⅱ형효원표체교4 d시명현증가(P＜0.05).B、D조Ⅰ형효원표체교4d시명현증가(P＜0.05),SOX9、단백다당급Ⅱ리효원교4d시무명현변화(P＞0.05).기중부A조X형효원표체정양성.결론 TGF-β,화BMP-7연합응용능촉진hBMSCs분화경접근우추간반세포,가능위추간반조직공정제공충자세포.
