中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
11期
945-947
,共3页
韩艳非%袁红艳%廖翔宇%刘超%常雅萍
韓豔非%袁紅豔%廖翔宇%劉超%常雅萍
한염비%원홍염%료상우%류초%상아평
抗菌肽%LL-37/hCAP-18%真核表达%MCF-7细胞
抗菌肽%LL-37/hCAP-18%真覈錶達%MCF-7細胞
항균태%LL-37/hCAP-18%진핵표체%MCF-7세포
目的 构建人源抗菌肽LL-37/hCAP-18的真核表达载体,并在人乳腺癌细胞MCF-7中进行表达.方法 以重组质粒pcDNA4.0-LL-37为模板,采用PCR法扩增LL-37/hCAP-18基因,连入pEGFP-c1质粒,构建真核表达载体pEGFP-c1-LL-37,瞬时转染人乳腺癌细胞MCF-7,采用激光共聚焦显微镜观察重组质粒的转染效率,RT-PCR法检测目的 基因的表达.结果 所构建的抗菌肽LL-37/hCAP-18真核表达载体经双酶切和测序证明构建正确,在瞬时转染MCF-7细胞48 h后,目的 基因转染效率较高,约为40%,RT-PCR结果显示,重组质粒转染的细胞可扩增出339 bp的目的 基凼条带.结论 已成功构建了人源抗菌肽LL-37/hCAP-18的真核表达载体,并在人乳腺癌细胞中获得表达,为进一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础.
目的 構建人源抗菌肽LL-37/hCAP-18的真覈錶達載體,併在人乳腺癌細胞MCF-7中進行錶達.方法 以重組質粒pcDNA4.0-LL-37為模闆,採用PCR法擴增LL-37/hCAP-18基因,連入pEGFP-c1質粒,構建真覈錶達載體pEGFP-c1-LL-37,瞬時轉染人乳腺癌細胞MCF-7,採用激光共聚焦顯微鏡觀察重組質粒的轉染效率,RT-PCR法檢測目的 基因的錶達.結果 所構建的抗菌肽LL-37/hCAP-18真覈錶達載體經雙酶切和測序證明構建正確,在瞬時轉染MCF-7細胞48 h後,目的 基因轉染效率較高,約為40%,RT-PCR結果顯示,重組質粒轉染的細胞可擴增齣339 bp的目的 基凼條帶.結論 已成功構建瞭人源抗菌肽LL-37/hCAP-18的真覈錶達載體,併在人乳腺癌細胞中穫得錶達,為進一步研究其抗腫瘤作用奠定瞭基礎.
목적 구건인원항균태LL-37/hCAP-18적진핵표체재체,병재인유선암세포MCF-7중진행표체.방법 이중조질립pcDNA4.0-LL-37위모판,채용PCR법확증LL-37/hCAP-18기인,련입pEGFP-c1질립,구건진핵표체재체pEGFP-c1-LL-37,순시전염인유선암세포MCF-7,채용격광공취초현미경관찰중조질립적전염효솔,RT-PCR법검측목적 기인적표체.결과 소구건적항균태LL-37/hCAP-18진핵표체재체경쌍매절화측서증명구건정학,재순시전염MCF-7세포48 h후,목적 기인전염효솔교고,약위40%,RT-PCR결과현시,중조질립전염적세포가확증출339 bp적목적 기당조대.결론 이성공구건료인원항균태LL-37/hCAP-18적진핵표체재체,병재인유선암세포중획득표체,위진일보연구기항종류작용전정료기출.
