中国妇幼保健
中國婦幼保健
중국부유보건
CHINESE JOURNAL OF MATERNAL AND CHILD HEALTH CARE
2008年
33期
4748-4752
,共5页
卵巢肿瘤%卵巢癌CAFs%增殖%凋亡%迁移%侵袭
卵巢腫瘤%卵巢癌CAFs%增殖%凋亡%遷移%侵襲
란소종류%란소암CAFs%증식%조망%천이%침습
目的:采用Transwell体外共培养体系,研究直接分离自卵巢癌的癌相关成纤维细胞CAFs对卵巢癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭活性的影响,探讨CAFs在上皮性卵巢癌进展中的作用.方法:1,采用0.4μm孔径的Tranwell小室进行CAFs或者NFs与卵巢癌细胞CAOV3体外共培养,用RT-PCR的方法检测共培养之后的卵巢癌细胞CAOV3中增殖细胞核抗原(PCNA)表达的改变,以了解卵巢癌细胞增殖的变化.2,用流式细胞仪检测共培养之后CAOV3细胞的细胞周期和Annexin-V/PI检测CAOV3细胞的凋亡情况.3,用8μm孔径的Transwell小室建立卵巢癌CAFs与CAOV3细胞的交互作用模型,观测CAFs对CA-OV3细胞迁移特性的影响.4,以Matrigel模拟重建基底膜,用8 μm孔径的Transwell小室建立卵巢癌CAFs与CAOV3细胞的交互作用模型,观测CAFs对CAOV3细胞侵袭特性的影响.结果:1,与CAFs共培养之后卵巢癌细胞CAOV3的PCNA基因表达显著增高,并且随着CAFs细胞量的增加,CAOV3细胞增殖活性显著增强.同时CAFs细胞的PCNA基因表达下降,随着CAOV3细胞数量的增加.PCNA表达明显减少(P=0.011).2,采用流式细胞仪检测细胞周期的方法可以发现,与CAFs共培养之后CAOV3细胞的凋亡显著减少(P=0.008).而在与NFs共培养之后的CAOV3细胞中未发现这一现象.3,同时用Annexin-V/PI的方法,用流式细胞仪进行检测,也可以证实与CAFs共培养之后CAOV3细胞的凋亡显著减少(P=0.01 1),而与NFs共培养之后.CAOV3的凋亡没有明显变化.4,与对照组相比CAFs或者NFs对CAOV3作用8 h后,CAOV3迁移明显增加,但CAFs组的增加有极显著性(P＜0.01).⑤侵袭实验中发现,与对照组相比CAFs或者NFs对CAOV3作用24 h后,CAOV3侵袭明显增强,但CAFs组的增强有极显著性(P＜0.01).结论:CAFs能促进卵巢癌CAOV3细胞的增殖,减少其凋亡,并且两种成纤维细胞对卵巢癌细胞均有促迁移和侵袭的作用,但是CAFs的作用更加显著.这些发现提示,在CAFs与卵巢癌CAOV3细胞的交互作用中,产生的信号因子能够促进卵巢癌的进展.
目的:採用Transwell體外共培養體繫,研究直接分離自卵巢癌的癌相關成纖維細胞CAFs對卵巢癌細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲活性的影響,探討CAFs在上皮性卵巢癌進展中的作用.方法:1,採用0.4μm孔徑的Tranwell小室進行CAFs或者NFs與卵巢癌細胞CAOV3體外共培養,用RT-PCR的方法檢測共培養之後的卵巢癌細胞CAOV3中增殖細胞覈抗原(PCNA)錶達的改變,以瞭解卵巢癌細胞增殖的變化.2,用流式細胞儀檢測共培養之後CAOV3細胞的細胞週期和Annexin-V/PI檢測CAOV3細胞的凋亡情況.3,用8μm孔徑的Transwell小室建立卵巢癌CAFs與CAOV3細胞的交互作用模型,觀測CAFs對CA-OV3細胞遷移特性的影響.4,以Matrigel模擬重建基底膜,用8 μm孔徑的Transwell小室建立卵巢癌CAFs與CAOV3細胞的交互作用模型,觀測CAFs對CAOV3細胞侵襲特性的影響.結果:1,與CAFs共培養之後卵巢癌細胞CAOV3的PCNA基因錶達顯著增高,併且隨著CAFs細胞量的增加,CAOV3細胞增殖活性顯著增彊.同時CAFs細胞的PCNA基因錶達下降,隨著CAOV3細胞數量的增加.PCNA錶達明顯減少(P=0.011).2,採用流式細胞儀檢測細胞週期的方法可以髮現,與CAFs共培養之後CAOV3細胞的凋亡顯著減少(P=0.008).而在與NFs共培養之後的CAOV3細胞中未髮現這一現象.3,同時用Annexin-V/PI的方法,用流式細胞儀進行檢測,也可以證實與CAFs共培養之後CAOV3細胞的凋亡顯著減少(P=0.01 1),而與NFs共培養之後.CAOV3的凋亡沒有明顯變化.4,與對照組相比CAFs或者NFs對CAOV3作用8 h後,CAOV3遷移明顯增加,但CAFs組的增加有極顯著性(P＜0.01).⑤侵襲實驗中髮現,與對照組相比CAFs或者NFs對CAOV3作用24 h後,CAOV3侵襲明顯增彊,但CAFs組的增彊有極顯著性(P＜0.01).結論:CAFs能促進卵巢癌CAOV3細胞的增殖,減少其凋亡,併且兩種成纖維細胞對卵巢癌細胞均有促遷移和侵襲的作用,但是CAFs的作用更加顯著.這些髮現提示,在CAFs與卵巢癌CAOV3細胞的交互作用中,產生的信號因子能夠促進卵巢癌的進展.
목적:채용Transwell체외공배양체계,연구직접분리자란소암적암상관성섬유세포CAFs대란소암세포증식、조망、천이화침습활성적영향,탐토CAFs재상피성란소암진전중적작용.방법:1,채용0.4μm공경적Tranwell소실진행CAFs혹자NFs여란소암세포CAOV3체외공배양,용RT-PCR적방법검측공배양지후적란소암세포CAOV3중증식세포핵항원(PCNA)표체적개변,이료해란소암세포증식적변화.2,용류식세포의검측공배양지후CAOV3세포적세포주기화Annexin-V/PI검측CAOV3세포적조망정황.3,용8μm공경적Transwell소실건립란소암CAFs여CAOV3세포적교호작용모형,관측CAFs대CA-OV3세포천이특성적영향.4,이Matrigel모의중건기저막,용8 μm공경적Transwell소실건립란소암CAFs여CAOV3세포적교호작용모형,관측CAFs대CAOV3세포침습특성적영향.결과:1,여CAFs공배양지후란소암세포CAOV3적PCNA기인표체현저증고,병차수착CAFs세포량적증가,CAOV3세포증식활성현저증강.동시CAFs세포적PCNA기인표체하강,수착CAOV3세포수량적증가.PCNA표체명현감소(P=0.011).2,채용류식세포의검측세포주기적방법가이발현,여CAFs공배양지후CAOV3세포적조망현저감소(P=0.008).이재여NFs공배양지후적CAOV3세포중미발현저일현상.3,동시용Annexin-V/PI적방법,용류식세포의진행검측,야가이증실여CAFs공배양지후CAOV3세포적조망현저감소(P=0.01 1),이여NFs공배양지후.CAOV3적조망몰유명현변화.4,여대조조상비CAFs혹자NFs대CAOV3작용8 h후,CAOV3천이명현증가,단CAFs조적증가유겁현저성(P＜0.01).⑤침습실험중발현,여대조조상비CAFs혹자NFs대CAOV3작용24 h후,CAOV3침습명현증강,단CAFs조적증강유겁현저성(P＜0.01).결론:CAFs능촉진란소암CAOV3세포적증식,감소기조망,병차량충성섬유세포대란소암세포균유촉천이화침습적작용,단시CAFs적작용경가현저.저사발현제시,재CAFs여란소암CAOV3세포적교호작용중,산생적신호인자능구촉진란소암적진전.
