重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2008年
21期
2430-2432,2436
,共4页
毕罡%靳风烁%吴刚%李彦锋%李黔生%张克勤%孙中义
畢罡%靳風爍%吳剛%李彥鋒%李黔生%張剋勤%孫中義
필강%근풍삭%오강%리언봉%리검생%장극근%손중의
产气荚膜梭菌肠毒素%表达%pET-28a%前列腺癌
產氣莢膜梭菌腸毒素%錶達%pET-28a%前列腺癌
산기협막사균장독소%표체%pET-28a%전렬선암
目的 构建含全长产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)基因的重组表达质粒pET-28a-CPE并进行原核表达.方法 培养并提取表达肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615的基因组DNA,PCR扩增出全长CPE基因片段并连接入pET-28a载体质粒中,构建重组原核表达质粒pET-28a-CPE,进行酶切及测序鉴定,并转化入感受态大肠杆菌(E.coli)BL21中,用IPTG诱导CPE表达.结果 复苏、培养成功产肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615,成功构建了表达质粒pET-28a-CPE,经酶切及测序鉴定结果 与设计的完全相符,成功用E.coil BL21进行了原核表达,目的 蛋白CPE占总表达蛋白45.37%.结论 本实验成功构建并表达了含CPE的重组质粒pET-28a-CPE,为进一步观察CPE时前列腺肿瘤等的生物学作用奠定了基础.
目的 構建含全長產氣莢膜梭菌腸毒素(CPE)基因的重組錶達質粒pET-28a-CPE併進行原覈錶達.方法 培養併提取錶達腸毒素的產氣莢膜梭菌標準菌株64615的基因組DNA,PCR擴增齣全長CPE基因片段併連接入pET-28a載體質粒中,構建重組原覈錶達質粒pET-28a-CPE,進行酶切及測序鑒定,併轉化入感受態大腸桿菌(E.coli)BL21中,用IPTG誘導CPE錶達.結果 複囌、培養成功產腸毒素的產氣莢膜梭菌標準菌株64615,成功構建瞭錶達質粒pET-28a-CPE,經酶切及測序鑒定結果 與設計的完全相符,成功用E.coil BL21進行瞭原覈錶達,目的 蛋白CPE佔總錶達蛋白45.37%.結論 本實驗成功構建併錶達瞭含CPE的重組質粒pET-28a-CPE,為進一步觀察CPE時前列腺腫瘤等的生物學作用奠定瞭基礎.
목적 구건함전장산기협막사균장독소(CPE)기인적중조표체질립pET-28a-CPE병진행원핵표체.방법 배양병제취표체장독소적산기협막사균표준균주64615적기인조DNA,PCR확증출전장CPE기인편단병련접입pET-28a재체질립중,구건중조원핵표체질립pET-28a-CPE,진행매절급측서감정,병전화입감수태대장간균(E.coli)BL21중,용IPTG유도CPE표체.결과 복소、배양성공산장독소적산기협막사균표준균주64615,성공구건료표체질립pET-28a-CPE,경매절급측서감정결과 여설계적완전상부,성공용E.coil BL21진행료원핵표체,목적 단백CPE점총표체단백45.37%.결론 본실험성공구건병표체료함CPE적중조질립pET-28a-CPE,위진일보관찰CPE시전렬선종류등적생물학작용전정료기출.
