华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2008年
4期
60-64
,共5页
杨小玲%季静%王罡%杨少辉%孙建学%张达威
楊小玲%季靜%王罡%楊少輝%孫建學%張達威
양소령%계정%왕강%양소휘%손건학%장체위
SeNHXI基因%GFP基因%酵母%表达载体%生长曲线%荧光%耐盐性
SeNHXI基因%GFP基因%酵母%錶達載體%生長麯線%熒光%耐鹽性
SeNHXI기인%GFP기인%효모%표체재체%생장곡선%형광%내염성
通过构建盐角草的液泡型Na+/H+反向转运蛋白SeNHX1基因的酵母表达载体,研究该基因对酵母耐盐性的影响.将SeNHX1基凶与荧光报告基因GFP融合,分别构建酵母表达载体pYES2.SeNHX1-GFP、pYES2-SeNHX1和pYES2-GFP,转化酵母W303,诱导3个载体表达,并测定含有不同表达载体的酵母生长曲线.结果表明.荧光显微镜下观察到带有报告基因GFP的2个转化子W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-GFP)均可发出绿色荧光,而没有报告基因的转化了W303(pYES2-SeNHX1)不发出荧光;在含有0.8 mol/L NaCl培养基中培养0～48 h内,W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-SeNHX1)菌株前期生长比对照菌株W303(pYES2-GFP)慢,但在培养48 h后则大大超过对照菌株.表明所构建带有目的基因SeNHX1的酵母表达载体已表达,且证实SeNHXl基因可提高酵母的耐盐性.
通過構建鹽角草的液泡型Na+/H+反嚮轉運蛋白SeNHX1基因的酵母錶達載體,研究該基因對酵母耐鹽性的影響.將SeNHX1基兇與熒光報告基因GFP融閤,分彆構建酵母錶達載體pYES2.SeNHX1-GFP、pYES2-SeNHX1和pYES2-GFP,轉化酵母W303,誘導3箇載體錶達,併測定含有不同錶達載體的酵母生長麯線.結果錶明.熒光顯微鏡下觀察到帶有報告基因GFP的2箇轉化子W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-GFP)均可髮齣綠色熒光,而沒有報告基因的轉化瞭W303(pYES2-SeNHX1)不髮齣熒光;在含有0.8 mol/L NaCl培養基中培養0～48 h內,W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-SeNHX1)菌株前期生長比對照菌株W303(pYES2-GFP)慢,但在培養48 h後則大大超過對照菌株.錶明所構建帶有目的基因SeNHX1的酵母錶達載體已錶達,且證實SeNHXl基因可提高酵母的耐鹽性.
통과구건염각초적액포형Na+/H+반향전운단백SeNHX1기인적효모표체재체,연구해기인대효모내염성적영향.장SeNHX1기흉여형광보고기인GFP융합,분별구건효모표체재체pYES2.SeNHX1-GFP、pYES2-SeNHX1화pYES2-GFP,전화효모W303,유도3개재체표체,병측정함유불동표체재체적효모생장곡선.결과표명.형광현미경하관찰도대유보고기인GFP적2개전화자W303(pYES2-SeNHX1-GFP)화W303(pYES2-GFP)균가발출록색형광,이몰유보고기인적전화료W303(pYES2-SeNHX1)불발출형광;재함유0.8 mol/L NaCl배양기중배양0～48 h내,W303(pYES2-SeNHX1-GFP)화W303(pYES2-SeNHX1)균주전기생장비대조균주W303(pYES2-GFP)만,단재배양48 h후칙대대초과대조균주.표명소구건대유목적기인SeNHX1적효모표체재체이표체,차증실SeNHXl기인가제고효모적내염성.
