过程工程学报
過程工程學報
과정공정학보
The Chinese Journal of Process Engineering
2008年
1期
125-129
,共5页
白雪晶%熊小超%姜声华%刘会洲%李信
白雪晶%熊小超%薑聲華%劉會洲%李信
백설정%웅소초%강성화%류회주%리신
二苯并噻吩%生物脱硫%脱硫基因%红球菌
二苯併噻吩%生物脫硫%脫硫基因%紅毬菌
이분병새분%생물탈류%탈류기인%홍구균
以专一性脱硫菌Rhodococcus sp.LY822质粒DNA为模板,利用已知的脱硫基因序列设计引物,PCR扩增得到了3个脱硫基因片段dszA,dszB和dszC.构建了相应的表达质粒pETA,pETB和pETC,在转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达,得到了dszA,dszB和dszC基因的融合表达产物.SDS-PAGE分析结果显示,蛋白带分子量分别为50,40和45 kDa.3种重组菌BL21(DE3)(pETA),BL21(DE3)(pETB)和BL21(DE3)(pETC)的无细胞粗提液(2 mL)的活性检测结果表明,DszC酶的粗提液反应30 min能够将0.02 mmol/L二苯并噻吩完全转化为二苯并噻吩砜,DszA酶的粗提液能够将0.01 mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为羟基联苯亚磺酸盐,DszA和DszB酶的粗提液联合作用能够将0.01 mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为2-羟基联苯,证明LY822对二苯并噻吩的降解符合专一性脱硫的"4S途径".
以專一性脫硫菌Rhodococcus sp.LY822質粒DNA為模闆,利用已知的脫硫基因序列設計引物,PCR擴增得到瞭3箇脫硫基因片段dszA,dszB和dszC.構建瞭相應的錶達質粒pETA,pETB和pETC,在轉化大腸桿菌BL21(DE3)中錶達,得到瞭dszA,dszB和dszC基因的融閤錶達產物.SDS-PAGE分析結果顯示,蛋白帶分子量分彆為50,40和45 kDa.3種重組菌BL21(DE3)(pETA),BL21(DE3)(pETB)和BL21(DE3)(pETC)的無細胞粗提液(2 mL)的活性檢測結果錶明,DszC酶的粗提液反應30 min能夠將0.02 mmol/L二苯併噻吩完全轉化為二苯併噻吩砜,DszA酶的粗提液能夠將0.01 mmol/L二苯併噻吩砜完全轉化為羥基聯苯亞磺痠鹽,DszA和DszB酶的粗提液聯閤作用能夠將0.01 mmol/L二苯併噻吩砜完全轉化為2-羥基聯苯,證明LY822對二苯併噻吩的降解符閤專一性脫硫的"4S途徑".
이전일성탈류균Rhodococcus sp.LY822질립DNA위모판,이용이지적탈류기인서렬설계인물,PCR확증득도료3개탈류기인편단dszA,dszB화dszC.구건료상응적표체질립pETA,pETB화pETC,재전화대장간균BL21(DE3)중표체,득도료dszA,dszB화dszC기인적융합표체산물.SDS-PAGE분석결과현시,단백대분자량분별위50,40화45 kDa.3충중조균BL21(DE3)(pETA),BL21(DE3)(pETB)화BL21(DE3)(pETC)적무세포조제액(2 mL)적활성검측결과표명,DszC매적조제액반응30 min능구장0.02 mmol/L이분병새분완전전화위이분병새분풍,DszA매적조제액능구장0.01 mmol/L이분병새분풍완전전화위간기련분아광산염,DszA화DszB매적조제액연합작용능구장0.01 mmol/L이분병새분풍완전전화위2-간기련분,증명LY822대이분병새분적강해부합전일성탈류적"4S도경".
