中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
75-80
,共6页
反胶束%胰蛋白酶%乙醇
反膠束%胰蛋白酶%乙醇
반효속%이단백매%을순
用反胶束技术分离纯化蛋白质,具有高选择性、易于大规模操作等优点,具有良好的工业应用前景.但是离子型表面活性剂形成的反胶束体系萃取蛋白质容易引起蛋白质的变性,这是由于离子型表面活性剂的强电荷作用所导致的.对用AOT/异辛烷反胶束体系从胰酶粗提物中萃取胰蛋白酶进行了研究,通过在反胶束相加入乙醇,解决了反胶束萃取蛋白质时蛋白质变性失活的问题.并且由于乙醇的加入大大减少了分相的时间,简化了实验步骤,优化了实验方法,使此技术在工业上的大规模应用成为可能.通过优化各种实验条件,胰蛋白酶的前萃取率达到90%,反萃取率接近100%.最终得率为88%.纯化后的比活提高了5倍多,从300U/mg左右提高到了1800U/mg.
用反膠束技術分離純化蛋白質,具有高選擇性、易于大規模操作等優點,具有良好的工業應用前景.但是離子型錶麵活性劑形成的反膠束體繫萃取蛋白質容易引起蛋白質的變性,這是由于離子型錶麵活性劑的彊電荷作用所導緻的.對用AOT/異辛烷反膠束體繫從胰酶粗提物中萃取胰蛋白酶進行瞭研究,通過在反膠束相加入乙醇,解決瞭反膠束萃取蛋白質時蛋白質變性失活的問題.併且由于乙醇的加入大大減少瞭分相的時間,簡化瞭實驗步驟,優化瞭實驗方法,使此技術在工業上的大規模應用成為可能.通過優化各種實驗條件,胰蛋白酶的前萃取率達到90%,反萃取率接近100%.最終得率為88%.純化後的比活提高瞭5倍多,從300U/mg左右提高到瞭1800U/mg.
용반효속기술분리순화단백질,구유고선택성、역우대규모조작등우점,구유량호적공업응용전경.단시리자형표면활성제형성적반효속체계췌취단백질용역인기단백질적변성,저시유우리자형표면활성제적강전하작용소도치적.대용AOT/이신완반효속체계종이매조제물중췌취이단백매진행료연구,통과재반효속상가입을순,해결료반효속췌취단백질시단백질변성실활적문제.병차유우을순적가입대대감소료분상적시간,간화료실험보취,우화료실험방법,사차기술재공업상적대규모응용성위가능.통과우화각충실험조건,이단백매적전췌취솔체도90%,반췌취솔접근100%.최종득솔위88%.순화후적비활제고료5배다,종300U/mg좌우제고도료1800U/mg.