中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2006年
12期
57-59
,共3页
小鼠%水平显微注射%转基因
小鼠%水平顯微註射%轉基因
소서%수평현미주사%전기인
由于传统显微注射法具有操作繁琐、技术要求高和外源基因导入率低等局限性,本试验对常规显微注射法进行改进,旨在建立一套比较完善的水平显微注射方法.采用水平微注射系统,将外源DNA片段导入胚胎的雄原核中,获得子代鼠,分娩后3周提取鼠尾基因组DNA,PCR法筛选转基因阳性鼠.本试验采用Puc/BLGINS和Chymosin基因,共使用710枚鼠原核胚进行研究,胚胎经注射后移植了25只受体,产下仔鼠77只;妊娠率分别为33.3%(5/15)和50%(5/10),胚胎成活率分别为9.47%(41/433)和l3.00%(36/277),阳性率分别为4.88%(2/41)和8.33%(3/36).将阳性雌鼠配种妊娠后,对外源基因整合情况进行检测,结果表明初步获得了转基因阳性小鼠.
由于傳統顯微註射法具有操作繁瑣、技術要求高和外源基因導入率低等跼限性,本試驗對常規顯微註射法進行改進,旨在建立一套比較完善的水平顯微註射方法.採用水平微註射繫統,將外源DNA片段導入胚胎的雄原覈中,穫得子代鼠,分娩後3週提取鼠尾基因組DNA,PCR法篩選轉基因暘性鼠.本試驗採用Puc/BLGINS和Chymosin基因,共使用710枚鼠原覈胚進行研究,胚胎經註射後移植瞭25隻受體,產下仔鼠77隻;妊娠率分彆為33.3%(5/15)和50%(5/10),胚胎成活率分彆為9.47%(41/433)和l3.00%(36/277),暘性率分彆為4.88%(2/41)和8.33%(3/36).將暘性雌鼠配種妊娠後,對外源基因整閤情況進行檢測,結果錶明初步穫得瞭轉基因暘性小鼠.
유우전통현미주사법구유조작번쇄、기술요구고화외원기인도입솔저등국한성,본시험대상규현미주사법진행개진,지재건립일투비교완선적수평현미주사방법.채용수평미주사계통,장외원DNA편단도입배태적웅원핵중,획득자대서,분면후3주제취서미기인조DNA,PCR법사선전기인양성서.본시험채용Puc/BLGINS화Chymosin기인,공사용710매서원핵배진행연구,배태경주사후이식료25지수체,산하자서77지;임신솔분별위33.3%(5/15)화50%(5/10),배태성활솔분별위9.47%(41/433)화l3.00%(36/277),양성솔분별위4.88%(2/41)화8.33%(3/36).장양성자서배충임신후,대외원기인정합정황진행검측,결과표명초보획득료전기인양성소서.
