科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2006年
12期
1602-1604
,共3页
苟兴春%金卫林%李容%鞠躬
茍興春%金衛林%李容%鞠躬
구흥춘%금위림%리용%국궁
NEP1-40%蛋白转导%包涵体%Nogo-66
NEP1-40%蛋白轉導%包涵體%Nogo-66
NEP1-40%단백전도%포함체%Nogo-66
为大量获得高纯度具有蛋白转导功能并可以穿过血脑屏障的融合蛋白TAT-NEP1-40,将构建好的表达载体pTAT-NEP1-40转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达后.将融合蛋白进行纯化和复性,鉴定蛋白转导功能.带有重组质粒pTAT-NEP40的大肠杆菌经IPTG诱导后,主要以包涵体形式表达,融合蛋白的分子量大小为14kD,其表达量占菌体总蛋白量的31.59%,纯化后目的蛋白纯度达95.6%,通过免疫组化染色显示融合蛋白可以穿过血脑屏障进入脑组织.上述结果表明利用pTAT-NEP1-40重组质粒,可以成功地表达TAT-NEP1-40;纯化后该蛋白具有穿过血脑屏障的功能,为NEP1-40功能的进一步研究提供了基础.
為大量穫得高純度具有蛋白轉導功能併可以穿過血腦屏障的融閤蛋白TAT-NEP1-40,將構建好的錶達載體pTAT-NEP1-40轉化大腸桿菌BL21(DE3)進行錶達後.將融閤蛋白進行純化和複性,鑒定蛋白轉導功能.帶有重組質粒pTAT-NEP40的大腸桿菌經IPTG誘導後,主要以包涵體形式錶達,融閤蛋白的分子量大小為14kD,其錶達量佔菌體總蛋白量的31.59%,純化後目的蛋白純度達95.6%,通過免疫組化染色顯示融閤蛋白可以穿過血腦屏障進入腦組織.上述結果錶明利用pTAT-NEP1-40重組質粒,可以成功地錶達TAT-NEP1-40;純化後該蛋白具有穿過血腦屏障的功能,為NEP1-40功能的進一步研究提供瞭基礎.
위대량획득고순도구유단백전도공능병가이천과혈뇌병장적융합단백TAT-NEP1-40,장구건호적표체재체pTAT-NEP1-40전화대장간균BL21(DE3)진행표체후.장융합단백진행순화화복성,감정단백전도공능.대유중조질립pTAT-NEP40적대장간균경IPTG유도후,주요이포함체형식표체,융합단백적분자량대소위14kD,기표체량점균체총단백량적31.59%,순화후목적단백순도체95.6%,통과면역조화염색현시융합단백가이천과혈뇌병장진입뇌조직.상술결과표명이용pTAT-NEP1-40중조질립,가이성공지표체TAT-NEP1-40;순화후해단백구유천과혈뇌병장적공능,위NEP1-40공능적진일보연구제공료기출.
