CAJ | 학술논문

背景与目的:促、抑凋亡因子间的相互作用与肿瘤的发生、发展密切相关.Omi/HtrA2是新近发现的一种凋亡调节因子,PED/PEA-15是一种广泛表达的抗凋亡蛋白.本研究旨在探讨Omi/HtrA2对PED/PEA-15表达和前列腺癌细胞PC-3凋亡的影响.方法:构建Omi/HtrA2的表达载体和siRNA载体,并用脂质体法分别将两载体转染至PC-3细胞中,Western blot和ELISA法检测Omi/HtrA2对PED/PEA-15表达和细胞凋亡的影响;Caspase-8检测试剂盒检测PED/PEA-15对Caspase-8活性的影响;Western blot、RT-PCR法检测Omi/HtrA2特异siRNA序列对其转录、翻译的影响,流式细胞仪检测siRNA导致Omi/HtrA2基因沉默后PC-3细胞凋亡的变化.结果:酶切和DNA测序证实Omi/HtrA2的表达载体和siRNA载体构建成功.通过转染Omi/HtrA2表达载体高表达Omi/HtrA2可抑制PED/PEA-1 5表达,并增加肿瘤细胞的凋亡率;抑制PED/PEA-15的表达可提高Caspase-8活性.siRNA沉默Omi/HtrA2基因后PC-3细胞对顺铂的敏感性降低.结论:Omi/HtrA2可通过抑制抗凋亡蛋白PED/PEA-15表达而在PC-3细胞凋亡中发挥重要作用.
배경여목적:촉、억조망인자간적상호작용여종류적발생、발전밀절상관.Omi/HtrA2시신근발현적일충조망조절인자,PED/PEA-15시일충엄범표체적항조망단백.본연구지재탐토Omi/HtrA2대PED/PEA-15표체화전렬선암세포PC-3조망적영향.방법:구건Omi/HtrA2적표체재체화siRNA재체,병용지질체법분별장량재체전염지PC-3세포중,Western blot화ELISA법검측Omi/HtrA2대PED/PEA-15표체화세포조망적영향;Caspase-8검측시제합검측PED/PEA-15대Caspase-8활성적영향;Western blot、RT-PCR법검측Omi/HtrA2특이siRNA서렬대기전록、번역적영향,류식세포의검측siRNA도치Omi/HtrA2기인침묵후PC-3세포조망적변화.결과:매절화DNA측서증실Omi/HtrA2적표체재체화siRNA재체구건성공.통과전염Omi/HtrA2표체재체고표체Omi/HtrA2가억제PED/PEA-1 5표체,병증가종류세포적조망솔;억제PED/PEA-15적표체가제고Caspase-8활성.siRNA침묵Omi/HtrA2기인후PC-3세포대순박적민감성강저.결론:Omi/HtrA2가통과억제항조망단백PED/PEA-15표체이재PC-3세포조망중발휘중요작용.