中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2006年
6期
801-806
,共6页
张阳德%张彦琼%陈记稷%张浩伟%张雅青%孔璐%潘一峰%刘键%王吉伟
張暘德%張彥瓊%陳記稷%張浩偉%張雅青%孔璐%潘一峰%劉鍵%王吉偉
장양덕%장언경%진기직%장호위%장아청%공로%반일봉%류건%왕길위
壳聚糖%碳纳米粉%PEGFP-C1%异硫氰酸荧光黄
殼聚糖%碳納米粉%PEGFP-C1%異硫氰痠熒光黃
각취당%탄납미분%PEGFP-C1%이류청산형광황
目的制备壳聚糖-碳纳米颗粒并研究其理化性质和体外活性.方法首先,用溶胶法制备出分散性良好的碳纳米粉末,再通过正负电荷相互吸引制备出壳聚糖-碳纳米颗粒;其次,用绿色荧光蛋白(PEGFP-C1)质粒DNA作报告基因,以静电吸附的方式将PEGFP-C1质粒DNA与壳聚糖-碳纳米颗粒结合形成载基因纳米粒;再次,用扫描电镜观察其形态特征,激光粒度分析仪测定其粒度分布及表面电位(Zeta电位),MTT试验检测壳聚糖-碳纳米载体对HepG2细胞和COS7细胞的毒性作用,凝胶阻滞实验确定该基因载体的DNA携带率,DNase Ⅰ保护实验研究其对所携带基因的保护作用,体外纳米粒导入实验定性评价纳米粒进入在体外进入细胞的活性,并用荧光显微镜观察导入效果.结果壳聚糖-碳纳米粒表面携带正电荷,聚合指数＜0.3;与DNA结合后效率较高,且可保护DNA免受DNase Ⅰ的降解;经FITC标记后能够成功地进入到COS7细胞和HepG2细胞.结论壳聚糖-碳纳米颗粒能进入到细胞内部,且导入效率较高,可以用作基因递送的非病毒载体系统,值得进一步研究.
目的製備殼聚糖-碳納米顆粒併研究其理化性質和體外活性.方法首先,用溶膠法製備齣分散性良好的碳納米粉末,再通過正負電荷相互吸引製備齣殼聚糖-碳納米顆粒;其次,用綠色熒光蛋白(PEGFP-C1)質粒DNA作報告基因,以靜電吸附的方式將PEGFP-C1質粒DNA與殼聚糖-碳納米顆粒結閤形成載基因納米粒;再次,用掃描電鏡觀察其形態特徵,激光粒度分析儀測定其粒度分佈及錶麵電位(Zeta電位),MTT試驗檢測殼聚糖-碳納米載體對HepG2細胞和COS7細胞的毒性作用,凝膠阻滯實驗確定該基因載體的DNA攜帶率,DNase Ⅰ保護實驗研究其對所攜帶基因的保護作用,體外納米粒導入實驗定性評價納米粒進入在體外進入細胞的活性,併用熒光顯微鏡觀察導入效果.結果殼聚糖-碳納米粒錶麵攜帶正電荷,聚閤指數＜0.3;與DNA結閤後效率較高,且可保護DNA免受DNase Ⅰ的降解;經FITC標記後能夠成功地進入到COS7細胞和HepG2細胞.結論殼聚糖-碳納米顆粒能進入到細胞內部,且導入效率較高,可以用作基因遞送的非病毒載體繫統,值得進一步研究.
목적제비각취당-탄납미과립병연구기이화성질화체외활성.방법수선,용용효법제비출분산성량호적탄납미분말,재통과정부전하상호흡인제비출각취당-탄납미과립;기차,용록색형광단백(PEGFP-C1)질립DNA작보고기인,이정전흡부적방식장PEGFP-C1질립DNA여각취당-탄납미과립결합형성재기인납미립;재차,용소묘전경관찰기형태특정,격광립도분석의측정기립도분포급표면전위(Zeta전위),MTT시험검측각취당-탄납미재체대HepG2세포화COS7세포적독성작용,응효조체실험학정해기인재체적DNA휴대솔,DNase Ⅰ보호실험연구기대소휴대기인적보호작용,체외납미립도입실험정성평개납미립진입재체외진입세포적활성,병용형광현미경관찰도입효과.결과각취당-탄납미립표면휴대정전하,취합지수＜0.3;여DNA결합후효솔교고,차가보호DNA면수DNase Ⅰ적강해;경FITC표기후능구성공지진입도COS7세포화HepG2세포.결론각취당-탄납미과립능진입도세포내부,차도입효솔교고,가이용작기인체송적비병독재체계통,치득진일보연구.
