中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2006年
4期
475-479
,共5页
邢玉芝%杨玲麟%林洪%胡火珍%王有为
邢玉芝%楊玲麟%林洪%鬍火珍%王有為
형옥지%양령린%림홍%호화진%왕유위
D-半乳糖%骨髓间充质干细胞%细胞衰老%大鼠
D-半乳糖%骨髓間充質榦細胞%細胞衰老%大鼠
D-반유당%골수간충질간세포%세포쇠로%대서
目的探讨D-半乳糖(D-galactose, D-gal) 诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)衰老后的形态学及生物学变化情况.方法取3只2月龄SD大鼠MSCs分离培养至第3代,一部分置于含8 g/L D-gal的培养液中继续培养至第6代作为诱导组;另一部分在原培养液中继续培养至第6代作为对照组,并作表型鉴定.采用流式细胞仪检测对照组加入8 g/L D-gal后4 d内细胞周期的分布变化.两组MSCs培养7 d并绘制生长曲线,在光镜和透射电镜下观察其形态和结构变化,β-半乳糖苷酶染色、单细胞凝胶电泳检测DNA损伤方法检测其衰老后的生物学行为变化.结果诱导组MSCs镜下呈典型的衰老细胞形态;对照组MSCs形态均匀,长势良好.流式细胞仪检测表明加入D-gal诱导后90% MSCs停留在G0/G1期,而S期和G2/M期MSCs趋于消失,并随诱导时间延长趋势越明显;对照组MSCs各期比例正常.MSCs生长曲线示诱导组生长速度较对照组明显减慢.诱导组约85%呈β-半乳糖苷酶阳性染色,对照组染色为阴性.单细胞凝胶电泳示诱导组MSCs DNA有拖尾现象,对照组MSCs无DNA损伤.结论 D-gal对SD大鼠MSCs的老化具有诱导作用,初步推断8 g/L为最适浓度,为研究MSCs衰老提供了较好的模型.
目的探討D-半乳糖(D-galactose, D-gal) 誘導SD大鼠骨髓間充質榦細胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)衰老後的形態學及生物學變化情況.方法取3隻2月齡SD大鼠MSCs分離培養至第3代,一部分置于含8 g/L D-gal的培養液中繼續培養至第6代作為誘導組;另一部分在原培養液中繼續培養至第6代作為對照組,併作錶型鑒定.採用流式細胞儀檢測對照組加入8 g/L D-gal後4 d內細胞週期的分佈變化.兩組MSCs培養7 d併繪製生長麯線,在光鏡和透射電鏡下觀察其形態和結構變化,β-半乳糖苷酶染色、單細胞凝膠電泳檢測DNA損傷方法檢測其衰老後的生物學行為變化.結果誘導組MSCs鏡下呈典型的衰老細胞形態;對照組MSCs形態均勻,長勢良好.流式細胞儀檢測錶明加入D-gal誘導後90% MSCs停留在G0/G1期,而S期和G2/M期MSCs趨于消失,併隨誘導時間延長趨勢越明顯;對照組MSCs各期比例正常.MSCs生長麯線示誘導組生長速度較對照組明顯減慢.誘導組約85%呈β-半乳糖苷酶暘性染色,對照組染色為陰性.單細胞凝膠電泳示誘導組MSCs DNA有拖尾現象,對照組MSCs無DNA損傷.結論 D-gal對SD大鼠MSCs的老化具有誘導作用,初步推斷8 g/L為最適濃度,為研究MSCs衰老提供瞭較好的模型.
목적탐토D-반유당(D-galactose, D-gal) 유도SD대서골수간충질간세포(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)쇠로후적형태학급생물학변화정황.방법취3지2월령SD대서MSCs분리배양지제3대,일부분치우함8 g/L D-gal적배양액중계속배양지제6대작위유도조;령일부분재원배양액중계속배양지제6대작위대조조,병작표형감정.채용류식세포의검측대조조가입8 g/L D-gal후4 d내세포주기적분포변화.량조MSCs배양7 d병회제생장곡선,재광경화투사전경하관찰기형태화결구변화,β-반유당감매염색、단세포응효전영검측DNA손상방법검측기쇠로후적생물학행위변화.결과유도조MSCs경하정전형적쇠로세포형태;대조조MSCs형태균균,장세량호.류식세포의검측표명가입D-gal유도후90% MSCs정류재G0/G1기,이S기화G2/M기MSCs추우소실,병수유도시간연장추세월명현;대조조MSCs각기비례정상.MSCs생장곡선시유도조생장속도교대조조명현감만.유도조약85%정β-반유당감매양성염색,대조조염색위음성.단세포응효전영시유도조MSCs DNA유타미현상,대조조MSCs무DNA손상.결론 D-gal대SD대서MSCs적노화구유유도작용,초보추단8 g/L위최괄농도,위연구MSCs쇠로제공료교호적모형.
