生物医学工程学杂志
生物醫學工程學雜誌
생물의학공정학잡지
2006年
2期
388-391
,共4页
黄强%陈利弘%曾令宇%万琳%李胜富%卢晓风%程惊秋
黃彊%陳利弘%曾令宇%萬琳%李勝富%盧曉風%程驚鞦
황강%진리홍%증령우%만림%리성부%로효풍%정량추
单链抗体%包涵体%复性
單鏈抗體%包涵體%複性
단련항체%포함체%복성
比较表达于大肠杆菌中的人源性抗细胞毒性T淋巴细胞抗原4单链抗体(Anti-CTLA4 scFv)的三种体外复性方法的复性效率.稀释、透析和亲和柱上三种复性方式复性Anti-CTLA4 scFv,采用Bradford法分析蛋白复性得率,采用间接细胞ELISA法检测所得蛋白的活性.透析复性蛋白得率最高,稀释复性蛋白得率其次,亲和柱上复性蛋白得率最低;透析复性所得蛋白结合活性是稀释复性的1.95倍,是亲和柱上复性所得蛋白活性的4.13倍(无谷胱甘肽氧化还原对GSH/GSSH)及3.63倍(有GSH/GSSH).结论:采用含0.15 mol/L NaCl、1 mmol/L GSSH和3 mmol/L GSH的50 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)缓冲液作为Anti-CTLA4 scFv的复性液,4℃下透析复性48 h,可获得较高复性得率和结合活性.
比較錶達于大腸桿菌中的人源性抗細胞毒性T淋巴細胞抗原4單鏈抗體(Anti-CTLA4 scFv)的三種體外複性方法的複性效率.稀釋、透析和親和柱上三種複性方式複性Anti-CTLA4 scFv,採用Bradford法分析蛋白複性得率,採用間接細胞ELISA法檢測所得蛋白的活性.透析複性蛋白得率最高,稀釋複性蛋白得率其次,親和柱上複性蛋白得率最低;透析複性所得蛋白結閤活性是稀釋複性的1.95倍,是親和柱上複性所得蛋白活性的4.13倍(無穀胱甘肽氧化還原對GSH/GSSH)及3.63倍(有GSH/GSSH).結論:採用含0.15 mol/L NaCl、1 mmol/L GSSH和3 mmol/L GSH的50 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)緩遲液作為Anti-CTLA4 scFv的複性液,4℃下透析複性48 h,可穫得較高複性得率和結閤活性.
비교표체우대장간균중적인원성항세포독성T림파세포항원4단련항체(Anti-CTLA4 scFv)적삼충체외복성방법적복성효솔.희석、투석화친화주상삼충복성방식복성Anti-CTLA4 scFv,채용Bradford법분석단백복성득솔,채용간접세포ELISA법검측소득단백적활성.투석복성단백득솔최고,희석복성단백득솔기차,친화주상복성단백득솔최저;투석복성소득단백결합활성시희석복성적1.95배,시친화주상복성소득단백활성적4.13배(무곡광감태양화환원대GSH/GSSH)급3.63배(유GSH/GSSH).결론:채용함0.15 mol/L NaCl、1 mmol/L GSSH화3 mmol/L GSH적50 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)완충액작위Anti-CTLA4 scFv적복성액,4℃하투석복성48 h,가획득교고복성득솔화결합활성.
