水疱性口炎病毒糖蛋白基因主要抗原表位区在大肠埃希氏菌中的高效表达及纯化
수포성구염병독당단백기인주요항원표위구재대장애희씨균중적고효표체급순화
Highly efficient expression and purification of truncated glycoprotein gene of vesicular stomatitis virus in Escherichia coli
  • 万方数据
    中国兽医科技 중국수의과기
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE AND TECHNOLOGY
    2005年 10期 757-760 ,共4页

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    수포성구염병독%당단백%항원표위%표체%순화
    利用PCR技术扩增编码水疱性口炎病毒印第安纳型(VSV-Ind)糖蛋白基因的主要抗原表位区,通过引入其两端的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点,定向插入到pET30c质粒T7启动子下游的多克隆区,构建重组质粒pET30c-vsvG,并转化至宿主菌BL21(DE3)株中.用1 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳表明,重组蛋白在大肠埃希氏菌中得到了高效表达,经过4 h表达即可达到高峰;融合蛋白的相对分子质量为57 ku.重组蛋白含有六聚组氨酸尾,主要以包涵体形式存在,Ni柱纯化后的蛋白经Western-blotting鉴定,具有良好的抗原性和特异性.
    이용PCR기술확증편마수포성구염병독인제안납형(VSV-Ind)당단백기인적주요항원표위구,통과인입기량단적EcoRⅠ화XhoⅠ매절위점,정향삽입도pET30c질립T7계동자하유적다극륭구,구건중조질립pET30c-vsvG,병전화지숙주균BL21(DE3)주중.용1 mmol/L IPTG유도후,SDS-PAGE전영표명,중조단백재대장애희씨균중득도료고효표체,경과4 h표체즉가체도고봉;융합단백적상대분자질량위57 ku.중조단백함유륙취조안산미,주요이포함체형식존재,Ni주순화후적단백경Western-blotting감정,구유량호적항원성화특이성.
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