中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2005年
5期
503-506
,共4页
王永山%范红结%李银%周宗安%施正良%王选年%张改平
王永山%範紅結%李銀%週宗安%施正良%王選年%張改平
왕영산%범홍결%리은%주종안%시정량%왕선년%장개평
传染性法氏囊病病毒(IBDV)%抗原表位%序列分析
傳染性法氏囊病病毒(IBDV)%抗原錶位%序列分析
전염성법씨낭병병독(IBDV)%항원표위%서렬분석
以5株传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)单克隆抗体HNF1、HNF7、B34、2B1和2G8作为筛选分子,对噬菌体展示12肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"淘洗,从每株单克隆抗体筛选到的噬菌斑中随机挑取12个单克隆蓝色噬菌斑,合计60个,用间接ELISA检测,A值大于1.00;用竞争抑制ELISA分析,单克隆抗体和IBDV抗原均能竞争抑制筛选12肽与固相包被单克隆抗体的反应,抑制率大于40%,表明在该12肽内含有IBDV抗原表位.选取35个单克隆噬菌斑,测定噬菌体gⅢ部分基因的核苷酸序列,确定了这5个含有不同IBDV抗原表位12肽的核苷酸和氨基酸序列.进一步将其与GenBank中IBDV基因组编码蛋白的氨基酸序列进行比较,发现2B1筛选肽有4个连续氨基酸残基Leu-Ala-Ser-Pro与IBDV基因组A片段编码多聚蛋白的第536-599氨基酸残基一致,推测2B1为线性表位;而HNF1、HNF7、B34和2G8筛选肽均没找到有3个以上连续氨基酸残基与IBDV蛋白序列相同之处,推测可能是构象依赖性表位.
以5株傳染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)單剋隆抗體HNF1、HNF7、B34、2B1和2G8作為篩選分子,對噬菌體展示12肽庫進行3輪"吸附-洗脫-擴增"淘洗,從每株單剋隆抗體篩選到的噬菌斑中隨機挑取12箇單剋隆藍色噬菌斑,閤計60箇,用間接ELISA檢測,A值大于1.00;用競爭抑製ELISA分析,單剋隆抗體和IBDV抗原均能競爭抑製篩選12肽與固相包被單剋隆抗體的反應,抑製率大于40%,錶明在該12肽內含有IBDV抗原錶位.選取35箇單剋隆噬菌斑,測定噬菌體gⅢ部分基因的覈苷痠序列,確定瞭這5箇含有不同IBDV抗原錶位12肽的覈苷痠和氨基痠序列.進一步將其與GenBank中IBDV基因組編碼蛋白的氨基痠序列進行比較,髮現2B1篩選肽有4箇連續氨基痠殘基Leu-Ala-Ser-Pro與IBDV基因組A片段編碼多聚蛋白的第536-599氨基痠殘基一緻,推測2B1為線性錶位;而HNF1、HNF7、B34和2G8篩選肽均沒找到有3箇以上連續氨基痠殘基與IBDV蛋白序列相同之處,推測可能是構象依賴性錶位.
이5주전염성법씨낭병병독(Infectious bursal disease virus,IBDV)단극륭항체HNF1、HNF7、B34、2B1화2G8작위사선분자,대서균체전시12태고진행3륜"흡부-세탈-확증"도세,종매주단극륭항체사선도적서균반중수궤도취12개단극륭람색서균반,합계60개,용간접ELISA검측,A치대우1.00;용경쟁억제ELISA분석,단극륭항체화IBDV항원균능경쟁억제사선12태여고상포피단극륭항체적반응,억제솔대우40%,표명재해12태내함유IBDV항원표위.선취35개단극륭서균반,측정서균체gⅢ부분기인적핵감산서렬,학정료저5개함유불동IBDV항원표위12태적핵감산화안기산서렬.진일보장기여GenBank중IBDV기인조편마단백적안기산서렬진행비교,발현2B1사선태유4개련속안기산잔기Leu-Ala-Ser-Pro여IBDV기인조A편단편마다취단백적제536-599안기산잔기일치,추측2B1위선성표위;이HNF1、HNF7、B34화2G8사선태균몰조도유3개이상련속안기산잔기여IBDV단백서렬상동지처,추측가능시구상의뢰성표위.
