科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2002年
8期
604-607
,共4页
赵华燕%魏建华%张景昱%刘惠荣%王台%宋艳茹
趙華燕%魏建華%張景昱%劉惠榮%王檯%宋豔茹
조화연%위건화%장경욱%류혜영%왕태%송염여
COMT CCoAOMT 反义RNA 木质素 组织化学染色
COMT CCoAOMT 反義RNA 木質素 組織化學染色
COMT CCoAOMT 반의RNA 목질소 조직화학염색
咖啡酸-3-O-甲基转移酶(COMT)与咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因分别编码植物木质素生物合成中不同底物水平的甲基化酶, 构建了它们的单价与双价反义表达载体, 并用农杆菌介导转化烟草. PCR-Southern检测表明外源基因已整合到烟草基因组DNA中; Northern点杂交结果表明外源基因在烟草中以转录水平表达. 对表达单个及两个甲基化酶反义基因的成熟转基因植株的木质素含量测定结果表明, 反义抑制COMT与CCoAOMT的表达均使转基因植株的木质素含量下降, 但单独抑制CCoAOMT表达引起的下降幅度明显大于COMT, 并且两个基因同时被抑制时, 降低幅度更大, 说明它们具有协同效应. 组织化学染色结果说明COMT被抑制引起紫丁香基(S)木质素显著减少. 上述结果表明, 抑制植物内源CCoAOMT表达是反向调控转基因植物木质素生物合成及改良造纸资源植物的有效途径.
咖啡痠-3-O-甲基轉移酶(COMT)與咖啡酰輔酶A-3-O-甲基轉移酶(CCoAOMT)基因分彆編碼植物木質素生物閤成中不同底物水平的甲基化酶, 構建瞭它們的單價與雙價反義錶達載體, 併用農桿菌介導轉化煙草. PCR-Southern檢測錶明外源基因已整閤到煙草基因組DNA中; Northern點雜交結果錶明外源基因在煙草中以轉錄水平錶達. 對錶達單箇及兩箇甲基化酶反義基因的成熟轉基因植株的木質素含量測定結果錶明, 反義抑製COMT與CCoAOMT的錶達均使轉基因植株的木質素含量下降, 但單獨抑製CCoAOMT錶達引起的下降幅度明顯大于COMT, 併且兩箇基因同時被抑製時, 降低幅度更大, 說明它們具有協同效應. 組織化學染色結果說明COMT被抑製引起紫丁香基(S)木質素顯著減少. 上述結果錶明, 抑製植物內源CCoAOMT錶達是反嚮調控轉基因植物木質素生物閤成及改良造紙資源植物的有效途徑.
가배산-3-O-갑기전이매(COMT)여가배선보매A-3-O-갑기전이매(CCoAOMT)기인분별편마식물목질소생물합성중불동저물수평적갑기화매, 구건료타문적단개여쌍개반의표체재체, 병용농간균개도전화연초. PCR-Southern검측표명외원기인이정합도연초기인조DNA중; Northern점잡교결과표명외원기인재연초중이전록수평표체. 대표체단개급량개갑기화매반의기인적성숙전기인식주적목질소함량측정결과표명, 반의억제COMT여CCoAOMT적표체균사전기인식주적목질소함량하강, 단단독억제CCoAOMT표체인기적하강폭도명현대우COMT, 병차량개기인동시피억제시, 강저폭도경대, 설명타문구유협동효응. 조직화학염색결과설명COMT피억제인기자정향기(S)목질소현저감소. 상술결과표명, 억제식물내원CCoAOMT표체시반향조공전기인식물목질소생물합성급개량조지자원식물적유효도경.
