中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2002年
6期
708-711
,共4页
肌肉LIM蛋白,生肌素,反式激活,AChR γ亚基基因
肌肉LIM蛋白,生肌素,反式激活,AChR γ亞基基因
기육LIM단백,생기소,반식격활,AChR γ아기기인
采用RT-PCR技术克隆了大鼠肌肉LIM蛋白(MLP)640 bp的全长cDNA序列.以此cDNA为探针进行的Northern印迹表明,MLP于C2C12细胞在分化的第3 d至第5 d表达.将MLP cDNA亚克隆至pcDNA3,构建真核表达质粒pcDNA3-MLP,同时构建AChR γ启动子序列(960 bp)调控的荧光素酶报告基因真核表达质粒pGL3-γ.C2C12细胞转染及荧光素酶活性分析表明,复合转染pcD-NA3-MLP和pGL3-γ的分化肌细胞表达的荧光素酶活性约为对照的4倍;而在3T3或未分化肌细胞复合转染pcDNA3-MLP和pGL3-γ均未检出报告基因表达,说明MLP可促进生肌素对AChRγ亚基基因启动子的反式激活作用.
採用RT-PCR技術剋隆瞭大鼠肌肉LIM蛋白(MLP)640 bp的全長cDNA序列.以此cDNA為探針進行的Northern印跡錶明,MLP于C2C12細胞在分化的第3 d至第5 d錶達.將MLP cDNA亞剋隆至pcDNA3,構建真覈錶達質粒pcDNA3-MLP,同時構建AChR γ啟動子序列(960 bp)調控的熒光素酶報告基因真覈錶達質粒pGL3-γ.C2C12細胞轉染及熒光素酶活性分析錶明,複閤轉染pcD-NA3-MLP和pGL3-γ的分化肌細胞錶達的熒光素酶活性約為對照的4倍;而在3T3或未分化肌細胞複閤轉染pcDNA3-MLP和pGL3-γ均未檢齣報告基因錶達,說明MLP可促進生肌素對AChRγ亞基基因啟動子的反式激活作用.
채용RT-PCR기술극륭료대서기육LIM단백(MLP)640 bp적전장cDNA서렬.이차cDNA위탐침진행적Northern인적표명,MLP우C2C12세포재분화적제3 d지제5 d표체.장MLP cDNA아극륭지pcDNA3,구건진핵표체질립pcDNA3-MLP,동시구건AChR γ계동자서렬(960 bp)조공적형광소매보고기인진핵표체질립pGL3-γ.C2C12세포전염급형광소매활성분석표명,복합전염pcD-NA3-MLP화pGL3-γ적분화기세포표체적형광소매활성약위대조적4배;이재3T3혹미분화기세포복합전염pcDNA3-MLP화pGL3-γ균미검출보고기인표체,설명MLP가촉진생기소대AChRγ아기기인계동자적반식격활작용.
