CAJ | 학술논문

采用PCR扩增和southern杂交筛选相结合的方法,从厦门水域的大型多管水母中分离到了新的绿色荧光蛋白基因gfpxm,并在大肠杆菌中进行了表达.gfpxmDNA序列编码区长为1 042 bp,包含3个外显子和两个内含子,cDNA编码区全长为717 bp.gfpxm cDNA与已知野生型Aeqgfp 10 cDNA长度一致,核苷酸同源性为81.9%,推导的氨基酸序列全长为238个氨基酸,与AeqGFP10的氨基酸同源性为83.6%.将gfpxm克隆至pTO-T7表达载体,GFPxm在大肠杆菌BL21中的表达量达菌体总蛋白的50%左右.荧光性质和强度分析结果表明,GFPxm蛋白的激发峰为476 nm,发射峰为496 nm,荧光量子产率为1.GFPxm蛋白的荧光很稳定,对热、碱性、变性剂和盐等有较强抗性.
채용PCR확증화southern잡교사선상결합적방법,종하문수역적대형다관수모중분리도료신적록색형광단백기인gfpxm,병재대장간균중진행료표체.gfpxmDNA서렬편마구장위1 042 bp,포함3개외현자화량개내함자,cDNA편마구전장위717 bp.gfpxm cDNA여이지야생형Aeqgfp 10 cDNA장도일치,핵감산동원성위81.9%,추도적안기산서렬전장위238개안기산,여AeqGFP10적안기산동원성위83.6%.장gfpxm극륭지pTO-T7표체재체,GFPxm재대장간균BL21중적표체량체균체총단백적50%좌우.형광성질화강도분석결과표명,GFPxm단백적격발봉위476 nm,발사봉위496 nm,형광양자산솔위1.GFPxm단백적형광흔은정,대열、감성、변성제화염등유교강항성.