湖南医科大学学报
湖南醫科大學學報
호남의과대학학보
BULLETIN OF HUNAN MEDICAL UNIVERSITY
2002年
3期
189-191
,共3页
谭志平%黄亮群%郑多%房海燕%夏昆%夏家辉
譚誌平%黃亮群%鄭多%房海燕%夏昆%夏傢輝
담지평%황량군%정다%방해연%하곤%하가휘
p11(Calpactin I,light chain)%融合蛋白,GST%亲和层析%抗血清
p11(Calpactin I,light chain)%融閤蛋白,GST%親和層析%抗血清
p11(Calpactin I,light chain)%융합단백,GST%친화층석%항혈청
目的: 表达GST-p11和6xHis-p11融合蛋白并制备GST-p11特异性抗体.方法: 将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX-4T-2和pQE30,分别在大肠杆菌BL21和M15中表达,用Glutathione Sepharose 4B和Ni-NTA agarose亲和柱分别纯化目的蛋白.利用纯化的GST-p11蛋白制备多克隆抗体.结果: 得到高表达量的融合蛋白,经亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-p11和6xHis-p11蛋白.以GST-p11蛋白免疫新西兰兔得到p11多克隆抗体,Western blotting证实该抗体能够识别6xHis-p11蛋白,具有较高特异性. 结论: 利用原核表达人p11融合蛋白制备的p11多克隆抗体具有较好的特异性,为研究p11蛋白在蛋白转运和定位过程中的作用提供重要的技术和材料保障.
目的: 錶達GST-p11和6xHis-p11融閤蛋白併製備GST-p11特異性抗體.方法: 將人p11基因剋隆入兩種原覈錶達載體pGEX-4T-2和pQE30,分彆在大腸桿菌BL21和M15中錶達,用Glutathione Sepharose 4B和Ni-NTA agarose親和柱分彆純化目的蛋白.利用純化的GST-p11蛋白製備多剋隆抗體.結果: 得到高錶達量的融閤蛋白,經親和層析柱純化穫得較高純度的GST-p11和6xHis-p11蛋白.以GST-p11蛋白免疫新西蘭兔得到p11多剋隆抗體,Western blotting證實該抗體能夠識彆6xHis-p11蛋白,具有較高特異性. 結論: 利用原覈錶達人p11融閤蛋白製備的p11多剋隆抗體具有較好的特異性,為研究p11蛋白在蛋白轉運和定位過程中的作用提供重要的技術和材料保障.
목적: 표체GST-p11화6xHis-p11융합단백병제비GST-p11특이성항체.방법: 장인p11기인극륭입량충원핵표체재체pGEX-4T-2화pQE30,분별재대장간균BL21화M15중표체,용Glutathione Sepharose 4B화Ni-NTA agarose친화주분별순화목적단백.이용순화적GST-p11단백제비다극륭항체.결과: 득도고표체량적융합단백,경친화층석주순화획득교고순도적GST-p11화6xHis-p11단백.이GST-p11단백면역신서란토득도p11다극륭항체,Western blotting증실해항체능구식별6xHis-p11단백,구유교고특이성. 결론: 이용원핵표체인p11융합단백제비적p11다극륭항체구유교호적특이성,위연구p11단백재단백전운화정위과정중적작용제공중요적기술화재료보장.
