浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2002年
2期
115-120,130
,共7页
姚航平%张立煌%孙文佶%冷建杭
姚航平%張立煌%孫文佶%冷建杭
요항평%장립황%손문길%랭건항
白细胞介素-18%腺病毒科/代谢%基因转移%重组腺病毒载体%胎肝细胞%脾内移植%免疫功能
白細胞介素-18%腺病毒科/代謝%基因轉移%重組腺病毒載體%胎肝細胞%脾內移植%免疫功能
백세포개소-18%선병독과/대사%기인전이%중조선병독재체%태간세포%비내이식%면역공능
目的:观察表达mIL-18的重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞(AdmIL-18/BNL.CL2)经脾移植对正常小鼠免疫功能的影响.方法:实验组小鼠经脾移植AdmIL-18/BNL.CL2,同时设LacZ病毒对照组(Ad-LacZ/BNL.CL2),BNL.CL2细胞对照组及空白对照组.2周后处死,留取血清,制备腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞、肝组织匀浆液,提取肝组织总RNA.采用ELISA法检测各组小鼠血清、腹腔Mφ和脾细胞培养上清、肝匀浆中细胞因子的含量;采用半定量RT-PCR法,检测肝组织细胞因子mRNA相对表达量;以LDH释放法测定腹腔Mφ杀伤活性和脾NK细胞活性,用MTT还原比色法测定脾淋巴细胞的增殖活性.结果:实验组小鼠血清、细胞培养上清及肝匀浆中,IL-18、IL-2、IFN-γ、TNF-α含量均高于其它对照组,而IL-4、IL-10水平则低于对照组;半定量RT-PCR结果与ELISA检测结果一致;同时,实验组腹腔Mφ的杀伤活性和脾NK细胞活性,及脾淋巴细胞增殖活性也明显高于对照组.结论:AdmIL-18能有效转染至胎肝细胞并稳定表达mIL-18;AdmIL-18基因修饰的胎肝细胞经脾移植后,可显著提高肝脏、脾脏免疫细胞活性,活化腹腔Mφ,促进Th1类细胞因子表达,抑制Th2类细胞因子的分泌.
目的:觀察錶達mIL-18的重組腺病毒基因脩飾的胎肝細胞(AdmIL-18/BNL.CL2)經脾移植對正常小鼠免疫功能的影響.方法:實驗組小鼠經脾移植AdmIL-18/BNL.CL2,同時設LacZ病毒對照組(Ad-LacZ/BNL.CL2),BNL.CL2細胞對照組及空白對照組.2週後處死,留取血清,製備腹腔巨噬細胞、脾淋巴細胞、肝組織勻漿液,提取肝組織總RNA.採用ELISA法檢測各組小鼠血清、腹腔Mφ和脾細胞培養上清、肝勻漿中細胞因子的含量;採用半定量RT-PCR法,檢測肝組織細胞因子mRNA相對錶達量;以LDH釋放法測定腹腔Mφ殺傷活性和脾NK細胞活性,用MTT還原比色法測定脾淋巴細胞的增殖活性.結果:實驗組小鼠血清、細胞培養上清及肝勻漿中,IL-18、IL-2、IFN-γ、TNF-α含量均高于其它對照組,而IL-4、IL-10水平則低于對照組;半定量RT-PCR結果與ELISA檢測結果一緻;同時,實驗組腹腔Mφ的殺傷活性和脾NK細胞活性,及脾淋巴細胞增殖活性也明顯高于對照組.結論:AdmIL-18能有效轉染至胎肝細胞併穩定錶達mIL-18;AdmIL-18基因脩飾的胎肝細胞經脾移植後,可顯著提高肝髒、脾髒免疫細胞活性,活化腹腔Mφ,促進Th1類細胞因子錶達,抑製Th2類細胞因子的分泌.
목적:관찰표체mIL-18적중조선병독기인수식적태간세포(AdmIL-18/BNL.CL2)경비이식대정상소서면역공능적영향.방법:실험조소서경비이식AdmIL-18/BNL.CL2,동시설LacZ병독대조조(Ad-LacZ/BNL.CL2),BNL.CL2세포대조조급공백대조조.2주후처사,류취혈청,제비복강거서세포、비림파세포、간조직균장액,제취간조직총RNA.채용ELISA법검측각조소서혈청、복강Mφ화비세포배양상청、간균장중세포인자적함량;채용반정량RT-PCR법,검측간조직세포인자mRNA상대표체량;이LDH석방법측정복강Mφ살상활성화비NK세포활성,용MTT환원비색법측정비림파세포적증식활성.결과:실험조소서혈청、세포배양상청급간균장중,IL-18、IL-2、IFN-γ、TNF-α함량균고우기타대조조,이IL-4、IL-10수평칙저우대조조;반정량RT-PCR결과여ELISA검측결과일치;동시,실험조복강Mφ적살상활성화비NK세포활성,급비림파세포증식활성야명현고우대조조.결론:AdmIL-18능유효전염지태간세포병은정표체mIL-18;AdmIL-18기인수식적태간세포경비이식후,가현저제고간장、비장면역세포활성,활화복강Mφ,촉진Th1류세포인자표체,억제Th2류세포인자적분비.