CAJ | 학술논문

采用PCR方法扩增了ZNF313基因的启动子序列,构建了含人ZNF313基因启动子不同片断的荧光素酶报告基因表达体系.以pRL-TK为内参照质粒,瞬时转染HEK293T细胞,48 h后收集细胞,测定荧光素酶的相对表达活性.结果发现,在ZNF313基因的启动子区域构建了4种荧光素酶报告基因表达体系,即pGL3-215(-215 bp～+38 bp)、pGL3-160(-160 bp～+38 bp)、pGL3-133(-133 bp～+128 bp)和pGL3-8(-8 bp～+128 bp).其中pGL3-215表达载体的荧光素酶相对表达活性最高;pGL3-160和pGL3-133表达载体的荧光素酶相对表达活性几乎相同,且是pGL3-215的75%;而pGL3-8的荧光素酶相对表达活性急剧下降,接近于零.这表明,-133 bp～-8 bp区域内含有人ZNF313基因转录所必需的启动子序列.生物信息学的分析表明,两个SP1、一个AP-2和一个T-Ag是人ZNF313基因启动子所必需的.图4参19
채용PCR방법확증료ZNF313기인적계동자서렬,구건료함인ZNF313기인계동자불동편단적형광소매보고기인표체체계.이pRL-TK위내삼조질립,순시전염HEK293T세포,48 h후수집세포,측정형광소매적상대표체활성.결과발현,재ZNF313기인적계동자구역구건료4충형광소매보고기인표체체계,즉pGL3-215(-215 bp～+38 bp)、pGL3-160(-160 bp～+38 bp)、pGL3-133(-133 bp～+128 bp)화pGL3-8(-8 bp～+128 bp).기중pGL3-215표체재체적형광소매상대표체활성최고;pGL3-160화pGL3-133표체재체적형광소매상대표체활성궤호상동,차시pGL3-215적75%;이pGL3-8적형광소매상대표체활성급극하강,접근우령.저표명,-133 bp～-8 bp구역내함유인ZNF313기인전록소필수적계동자서렬.생물신식학적분석표명,량개SP1、일개AP-2화일개T-Ag시인ZNF313기인계동자소필수적.도4삼19