中华医院感染学杂志
中華醫院感染學雜誌
중화의원감염학잡지
Chinese Journal of Nosocomiology
2006年
7期
729-733
,共5页
申建维%王旭%范春明%孙秀琴%杜万英%万玉梅%彭铁汉%袁玮
申建維%王旭%範春明%孫秀琴%杜萬英%萬玉梅%彭鐵漢%袁瑋
신건유%왕욱%범춘명%손수금%두만영%만옥매%팽철한%원위
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌%环介导等温扩增反应%分子信标探针
耐甲氧西林金黃色葡萄毬菌%環介導等溫擴增反應%分子信標探針
내갑양서림금황색포도구균%배개도등온확증반응%분자신표탐침
目的建立多重分子信标环介导的等温扩增快速检测葡萄球菌耐药基因mecA和种特异性基因femA的方法. 方法利用包被有SPA单克隆抗体的磁珠富集样品中的金黄色葡萄球菌,快速提取其DNA,用多重环介导等温扩增反应(LAMP)同时扩增金黄色葡萄球菌耐药基因mecA和femA,扩增条件为65℃保温1 h;在反应过程中,两种分子信标荧光探针分别与mecA和femA基因的扩增产物互补序列结合,探针上的FAM和TET荧光分子产生两种荧光,最后检测反应管中的两种荧光值. 结果该方法的最低检测限为10CFU/ml,与M-H培养基苯唑西林药敏试验结果相比较,灵敏度99.0%,特异度90.9%. 结论该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便快速,适用于直接快速基因检测临床样品中MRSA.
目的建立多重分子信標環介導的等溫擴增快速檢測葡萄毬菌耐藥基因mecA和種特異性基因femA的方法. 方法利用包被有SPA單剋隆抗體的磁珠富集樣品中的金黃色葡萄毬菌,快速提取其DNA,用多重環介導等溫擴增反應(LAMP)同時擴增金黃色葡萄毬菌耐藥基因mecA和femA,擴增條件為65℃保溫1 h;在反應過程中,兩種分子信標熒光探針分彆與mecA和femA基因的擴增產物互補序列結閤,探針上的FAM和TET熒光分子產生兩種熒光,最後檢測反應管中的兩種熒光值. 結果該方法的最低檢測限為10CFU/ml,與M-H培養基苯唑西林藥敏試驗結果相比較,靈敏度99.0%,特異度90.9%. 結論該方法具有靈敏度高、特異性彊、操作簡便快速,適用于直接快速基因檢測臨床樣品中MRSA.
목적건립다중분자신표배개도적등온확증쾌속검측포도구균내약기인mecA화충특이성기인femA적방법. 방법이용포피유SPA단극륭항체적자주부집양품중적금황색포도구균,쾌속제취기DNA,용다중배개도등온확증반응(LAMP)동시확증금황색포도구균내약기인mecA화femA,확증조건위65℃보온1 h;재반응과정중,량충분자신표형광탐침분별여mecA화femA기인적확증산물호보서렬결합,탐침상적FAM화TET형광분자산생량충형광,최후검측반응관중적량충형광치. 결과해방법적최저검측한위10CFU/ml,여M-H배양기분서서림약민시험결과상비교,령민도99.0%,특이도90.9%. 결론해방법구유령민도고、특이성강、조작간편쾌속,괄용우직접쾌속기인검측림상양품중MRSA.
