花生学报
花生學報
화생학보
PEANUT SCIENCE AND TECHNOLOGY
2007年
1期
1-6,12
,共7页
谢金喜%蔡宁波%石新国%庄伟建
謝金喜%蔡寧波%石新國%莊偉建
사금희%채저파%석신국%장위건
Δ12脂肪酸脱氢酶基因%克隆%反义RNA%载体构建
Δ12脂肪痠脫氫酶基因%剋隆%反義RNA%載體構建
Δ12지방산탈경매기인%극륭%반의RNA%재체구건
从花生的幼嫩叶片中提取总DNA,应用PCR方法分离到了两个FAD2基因片段,分别命名为FAD2-1和FAD2-2,将反向的FAD2-1和FAD2-2片段分别与所克隆的大豆油体蛋白基因启动子片段oleosin-a与oleosin-b相连,在中间表达载体pSPROK中构建了三个带T-nos的融合基因,进而把融合基因构建到植物表达载体pCAMBIA1300中,酶切鉴定后进行测序,结果表明,所构建的三个植物表达载体均分别带有Oleosin启动子和反义FAD2基因序列,FAD2-2的长度为593bps,与引用序列的同源性达到97%,包含一个起始密码子;FAD2-1的长度为1175bp,与引用序列的同源性达到99%,包含一个起始密码子与一个终止密码子.将构建好的植物表达载体已经转化农杆菌LBA4404并用于侵染花生外植体.
從花生的幼嫩葉片中提取總DNA,應用PCR方法分離到瞭兩箇FAD2基因片段,分彆命名為FAD2-1和FAD2-2,將反嚮的FAD2-1和FAD2-2片段分彆與所剋隆的大豆油體蛋白基因啟動子片段oleosin-a與oleosin-b相連,在中間錶達載體pSPROK中構建瞭三箇帶T-nos的融閤基因,進而把融閤基因構建到植物錶達載體pCAMBIA1300中,酶切鑒定後進行測序,結果錶明,所構建的三箇植物錶達載體均分彆帶有Oleosin啟動子和反義FAD2基因序列,FAD2-2的長度為593bps,與引用序列的同源性達到97%,包含一箇起始密碼子;FAD2-1的長度為1175bp,與引用序列的同源性達到99%,包含一箇起始密碼子與一箇終止密碼子.將構建好的植物錶達載體已經轉化農桿菌LBA4404併用于侵染花生外植體.
종화생적유눈협편중제취총DNA,응용PCR방법분리도료량개FAD2기인편단,분별명명위FAD2-1화FAD2-2,장반향적FAD2-1화FAD2-2편단분별여소극륭적대두유체단백기인계동자편단oleosin-a여oleosin-b상련,재중간표체재체pSPROK중구건료삼개대T-nos적융합기인,진이파융합기인구건도식물표체재체pCAMBIA1300중,매절감정후진행측서,결과표명,소구건적삼개식물표체재체균분별대유Oleosin계동자화반의FAD2기인서렬,FAD2-2적장도위593bps,여인용서렬적동원성체도97%,포함일개기시밀마자;FAD2-1적장도위1175bp,여인용서렬적동원성체도99%,포함일개기시밀마자여일개종지밀마자.장구건호적식물표체재체이경전화농간균LBA4404병용우침염화생외식체.
