中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2007年
3期
61-65
,共5页
尹哲%吉栩%吴云锋%李毅
尹哲%吉栩%吳雲鋒%李毅
윤철%길허%오운봉%리의
水稻矮缩病毒%微核心蛋白P9%转录激活活性
水稻矮縮病毒%微覈心蛋白P9%轉錄激活活性
수도왜축병독%미핵심단백P9%전록격활활성
将RDV 微核心蛋白基因S9克隆到酵母表达载体pGBKT7中,转入AH109酵母细胞,转化子可以在SD/ Trp-His-Ade-多营养缺陷固体培养基上正常生长,证明RDV P9在酵母中具有转录激活活性,运用β-半乳糖苷酶的活性分析对重组质粒转化子的转录激活程度做了定量分析,发现与正对照相比,转化pGBK-S9的酵母菌中β-半乳糖苷酶活性可达到正对照的40%以上.构建了含有gusA报告基因的植物表达载体用来分析P9在植物中的转录激活活性,实验结果表明,融合GAL4 DB的P9蛋白可以在植物体内激活报告基因的表达,Western 印迹法分析表明了P9蛋白在酵母和植物中均可以表达.证明了在植物体内RDV P9蛋白同样能够激活基因的转录,暗示该蛋白可能在病毒的侵染和复制过程中参与调控病毒或寄主基因的转录表达.
將RDV 微覈心蛋白基因S9剋隆到酵母錶達載體pGBKT7中,轉入AH109酵母細胞,轉化子可以在SD/ Trp-His-Ade-多營養缺陷固體培養基上正常生長,證明RDV P9在酵母中具有轉錄激活活性,運用β-半乳糖苷酶的活性分析對重組質粒轉化子的轉錄激活程度做瞭定量分析,髮現與正對照相比,轉化pGBK-S9的酵母菌中β-半乳糖苷酶活性可達到正對照的40%以上.構建瞭含有gusA報告基因的植物錶達載體用來分析P9在植物中的轉錄激活活性,實驗結果錶明,融閤GAL4 DB的P9蛋白可以在植物體內激活報告基因的錶達,Western 印跡法分析錶明瞭P9蛋白在酵母和植物中均可以錶達.證明瞭在植物體內RDV P9蛋白同樣能夠激活基因的轉錄,暗示該蛋白可能在病毒的侵染和複製過程中參與調控病毒或寄主基因的轉錄錶達.
장RDV 미핵심단백기인S9극륭도효모표체재체pGBKT7중,전입AH109효모세포,전화자가이재SD/ Trp-His-Ade-다영양결함고체배양기상정상생장,증명RDV P9재효모중구유전록격활활성,운용β-반유당감매적활성분석대중조질립전화자적전록격활정도주료정량분석,발현여정대조상비,전화pGBK-S9적효모균중β-반유당감매활성가체도정대조적40%이상.구건료함유gusA보고기인적식물표체재체용래분석P9재식물중적전록격활활성,실험결과표명,융합GAL4 DB적P9단백가이재식물체내격활보고기인적표체,Western 인적법분석표명료P9단백재효모화식물중균가이표체.증명료재식물체내RDV P9단백동양능구격활기인적전록,암시해단백가능재병독적침염화복제과정중삼여조공병독혹기주기인적전록표체.
