作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2008年
2期
224-231
,共8页
曹景林%张献龙%金双侠%杨细燕%朱华国%付莉莉
曹景林%張獻龍%金雙俠%楊細燕%硃華國%付莉莉
조경림%장헌룡%금쌍협%양세연%주화국%부리리
棉花%体细胞胚胎发生%同步控制%培养体系
棉花%體細胞胚胎髮生%同步控製%培養體繫
면화%체세포배태발생%동보공제%배양체계
棉花体细胞胚胎发生的频率低,且体细胞胚的发育存在着不同步性,给体细胞胚胎发生发育过程的生理学、生物化学和分子生物学的研究带来许多困难.本研究以陆地棉品种Coker201为材料,建立了一种简单有效的棉花体细胞胚高频率发生和同步发育的培养体系.经过多次继代获得的胚性愈伤,首先在液体培养基中振荡培养2 d使其分散,然后过30目筛去除大的颗粒,重新悬浮于同样的液体培养基中.悬浮培养14 d后,过50目筛,将筛上的胚性愈伤重悬浮于新鲜的培养基中,并用吸管吸取悬浮液,将其均匀地接种在表面垫有滤纸的同成分固体培养基(附加2.46μmol L-1 IBA和0.70 μmol L-1 kinetin)上.培养21 d后,用垫有滤纸的相同的固体培养基继代培养.利用这种培养体系,获得的体细胞胚数量分别是单纯悬浮培养和固体培养(不垫滤纸)的16.5倍和4.0倍.其中,球形胚、鱼雷形胚和子叶胚的同步发生率分别为70.2%、52.3%和73.0%.
棉花體細胞胚胎髮生的頻率低,且體細胞胚的髮育存在著不同步性,給體細胞胚胎髮生髮育過程的生理學、生物化學和分子生物學的研究帶來許多睏難.本研究以陸地棉品種Coker201為材料,建立瞭一種簡單有效的棉花體細胞胚高頻率髮生和同步髮育的培養體繫.經過多次繼代穫得的胚性愈傷,首先在液體培養基中振盪培養2 d使其分散,然後過30目篩去除大的顆粒,重新懸浮于同樣的液體培養基中.懸浮培養14 d後,過50目篩,將篩上的胚性愈傷重懸浮于新鮮的培養基中,併用吸管吸取懸浮液,將其均勻地接種在錶麵墊有濾紙的同成分固體培養基(附加2.46μmol L-1 IBA和0.70 μmol L-1 kinetin)上.培養21 d後,用墊有濾紙的相同的固體培養基繼代培養.利用這種培養體繫,穫得的體細胞胚數量分彆是單純懸浮培養和固體培養(不墊濾紙)的16.5倍和4.0倍.其中,毬形胚、魚雷形胚和子葉胚的同步髮生率分彆為70.2%、52.3%和73.0%.
면화체세포배태발생적빈솔저,차체세포배적발육존재착불동보성,급체세포배태발생발육과정적생이학、생물화학화분자생물학적연구대래허다곤난.본연구이륙지면품충Coker201위재료,건립료일충간단유효적면화체세포배고빈솔발생화동보발육적배양체계.경과다차계대획득적배성유상,수선재액체배양기중진탕배양2 d사기분산,연후과30목사거제대적과립,중신현부우동양적액체배양기중.현부배양14 d후,과50목사,장사상적배성유상중현부우신선적배양기중,병용흡관흡취현부액,장기균균지접충재표면점유려지적동성분고체배양기(부가2.46μmol L-1 IBA화0.70 μmol L-1 kinetin)상.배양21 d후,용점유려지적상동적고체배양기계대배양.이용저충배양체계,획득적체세포배수량분별시단순현부배양화고체배양(불점려지)적16.5배화4.0배.기중,구형배、어뢰형배화자협배적동보발생솔분별위70.2%、52.3%화73.0%.
