CAJ | 학술논문

背景与目的:转录因子E2F-1作为细胞周期进程中重要的调控因子,与肿瘤的发生有着密切的关系.本研究通过转染人E2F-1基因的小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1表达及侵袭和增殖能力的影响.方法:用脂质体LipofectamineTM 2000将具有短发夹结构的人E2F-1 siRNA表达质粒转染至MGC803细胞,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹(Western blot)技术分别检测E2F-1 mRNA及蛋白的表达;应用体外侵袭实验及克隆实验分别检测E2F-1 siRNA表达质粒对MGC803细胞侵袭力和增殖能力的影响.结果:成功转染E2F-1 siRNA表达质粒48 h后.MGC803细胞中E2F-1基凶mRNA表达的抑制率超过90%;与未转染组及阴性对照组细胞比较,E2F-1蛋白的表达分别降低81.5%和79.6%.转染pSilencer4.1-E2F-1质粒组的穿膜细胞数(18.0±2.6)与阴性对照组(48.0±4.6)和空白对照组(54.0±5.6)比较差异有统计学意义(P<0.05),其细胞集落形成数(46.0±2.0)与阴性对照组(122.3±1.5)和空白对照组(128.7±2.1)比较差异也有统计学意义(P<0.05).结论:E2F-1 siRNA表达质粒可显著下调E2F-1基因在胃癌MGC803细胞中的表达,在一定程度上抑制胃癌细胞的侵袭和增殖.
배경여목적:전록인자E2F-1작위세포주기진정중중요적조공인자,여종류적발생유착밀절적관계.본연구통과전염인E2F-1기인적소간우RNA (small interfering RNA,siRNA)표체질립,탐토기대위암MGC803세포중E2F-1표체급침습화증식능력적영향.방법:용지질체LipofectamineTM 2000장구유단발협결구적인E2F-1 siRNA표체질립전염지MGC803세포,이역전록-취합매련반응(RT-PCR)급단백인적(Western blot)기술분별검측E2F-1 mRNA급단백적표체;응용체외침습실험급극륭실험분별검측E2F-1 siRNA표체질립대MGC803세포침습력화증식능력적영향.결과:성공전염E2F-1 siRNA표체질립48 h후.MGC803세포중E2F-1기흉mRNA표체적억제솔초과90%;여미전염조급음성대조조세포비교,E2F-1단백적표체분별강저81.5%화79.6%.전염pSilencer4.1-E2F-1질립조적천막세포수(18.0±2.6)여음성대조조(48.0±4.6)화공백대조조(54.0±5.6)비교차이유통계학의의(P<0.05),기세포집락형성수(46.0±2.0)여음성대조조(122.3±1.5)화공백대조조(128.7±2.1)비교차이야유통계학의의(P<0.05).결론:E2F-1 siRNA표체질립가현저하조E2F-1기인재위암MGC803세포중적표체,재일정정도상억제위암세포적침습화증식.