WSSV和IHHNV二重实时荧光PCR检测方法的建立
WSSV화IHHNV이중실시형광PCR검측방법적건립
DEVELOPMENT OF A MULTIPLEX REAL-TIME PCR ASSAY FOR DETECTION OF WSSV AND IHHNV
  • 万方数据
    水生生物学报 수생생물학보
    ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
    2009年 1期 22-27 ,共6页

    谢芝勋%谢丽基%庞耀珊%卢兆发%谢志勤%孙建华%邓显文%刘加波%唐小飞

    사지훈%사려기%방요산%로조발%사지근%손건화%산현문%류가파%당소비

    白斑综合征病毒%对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒%多重实时荧光PCR 白斑綜閤徵病毒%對蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒%多重實時熒光PCR
    백반종합정병독%대하전염성피하급조혈조직배사병독%다중실시형광PCR
    根据基因库中对虾白斑综合症病毒WSSV(A.F369029)和传染件皮下及造血器官坏死病毒IHHNV(AF218226)基因序列,设计了WSSV和IHHNV的两对特异性引物和两条用不同荧光基团标记的TaqMan探针.对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测WSSV和IHHNV的二重实时荧光PCR方法.该方法特异性好,对WSSV和IHHNV的检测敏感件分别达到2和20个模板拷贝数;此外抗干扰能力强,对WSSV和IHHNV不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测这二个病毒.对保存的30份经常规PCR检测仪为WSSV或IHHNV阳性的样品进行二重实时荧光PCR检测,结果都为阳性,其中1份为WSSV和IHHNV混合感染.本研究建立的二重实时荧光PCR方法用于WSSV和IHHNv的检测具有特异、敏感、快速、定量等优点.
    근거기인고중대하백반종합증병독WSSV(A.F369029)화전염건피하급조혈기관배사병독IHHNV(AF218226)기인서렬,설계료WSSV화IHHNV적량대특이성인물화량조용불동형광기단표기적TaqMan탐침.대반응조건화시제농도진행우화,건립료능구동시검측WSSV화IHHNV적이중실시형광PCR방법.해방법특이성호,대WSSV화IHHNV적검측민감건분별체도2화20개모판고패수;차외항간우능력강,대WSSV화IHHNV불동모판농도진행조합,잉가유효지동시검측저이개병독.대보존적30빈경상규PCR검측의위WSSV혹IHHNV양성적양품진행이중실시형광PCR검측,결과도위양성,기중1빈위WSSV화IHHNV혼합감염.본연구건립적이중실시형광PCR방법용우WSSV화IHHNv적검측구유특이、민감、쾌속、정량등우점.
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