细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
8期
732-734,737
,共4页
赵振富%苏雪莹%初国良%徐杰%汪华侨%姚志彬
趙振富%囌雪瑩%初國良%徐傑%汪華僑%姚誌彬
조진부%소설형%초국량%서걸%왕화교%요지빈
阿尔茨海默病%噬菌体展示抗体库%单链可变区抗体%β淀粉样蛋白
阿爾茨海默病%噬菌體展示抗體庫%單鏈可變區抗體%β澱粉樣蛋白
아이자해묵병%서균체전시항체고%단련가변구항체%β정분양단백
目的: 构建人源性的老年痴呆(AD)噬菌体抗体库,筛选1株人源性的β-淀粉样蛋白(Aβ)特异性单链抗体(scFv).方法: 利用噬菌体展示技术,用20个AD患者的外周血B细胞首次构建了AD患者的单链可变区噬菌体抗体库.以Aβ40为靶,挑选出77个阳性抗体克隆,从中筛选出一个抗Aβ scFv-H1,并对其重链和轻链可变区基因进行测序分析.利用预吸附实验及竞争性ELISA测定该抗体对Aβ40的特异性及结合位点. 结果: 成功构建出AD患者的单链可变区噬菌体抗体库,库容量为1.5×106.从库中筛选出1株抗Aβ40的单链噬菌体抗体-H1,DNA测序结果证实了其抗体的基因结构及氨基酸序列.预吸附及竞争性ELISA证实该抗体对Aβ40的结合表位位于蛋白氨基端的1到16个氨基酸内. 结论: 利用噬菌体抗体库技术可成功制备Aβ肽特异性scFv,为AD患者的临床诊断和被动免疫治疗提供了一种新的可供选择的途径.
目的: 構建人源性的老年癡呆(AD)噬菌體抗體庫,篩選1株人源性的β-澱粉樣蛋白(Aβ)特異性單鏈抗體(scFv).方法: 利用噬菌體展示技術,用20箇AD患者的外週血B細胞首次構建瞭AD患者的單鏈可變區噬菌體抗體庫.以Aβ40為靶,挑選齣77箇暘性抗體剋隆,從中篩選齣一箇抗Aβ scFv-H1,併對其重鏈和輕鏈可變區基因進行測序分析.利用預吸附實驗及競爭性ELISA測定該抗體對Aβ40的特異性及結閤位點. 結果: 成功構建齣AD患者的單鏈可變區噬菌體抗體庫,庫容量為1.5×106.從庫中篩選齣1株抗Aβ40的單鏈噬菌體抗體-H1,DNA測序結果證實瞭其抗體的基因結構及氨基痠序列.預吸附及競爭性ELISA證實該抗體對Aβ40的結閤錶位位于蛋白氨基耑的1到16箇氨基痠內. 結論: 利用噬菌體抗體庫技術可成功製備Aβ肽特異性scFv,為AD患者的臨床診斷和被動免疫治療提供瞭一種新的可供選擇的途徑.
목적: 구건인원성적노년치태(AD)서균체항체고,사선1주인원성적β-정분양단백(Aβ)특이성단련항체(scFv).방법: 이용서균체전시기술,용20개AD환자적외주혈B세포수차구건료AD환자적단련가변구서균체항체고.이Aβ40위파,도선출77개양성항체극륭,종중사선출일개항Aβ scFv-H1,병대기중련화경련가변구기인진행측서분석.이용예흡부실험급경쟁성ELISA측정해항체대Aβ40적특이성급결합위점. 결과: 성공구건출AD환자적단련가변구서균체항체고,고용량위1.5×106.종고중사선출1주항Aβ40적단련서균체항체-H1,DNA측서결과증실료기항체적기인결구급안기산서렬.예흡부급경쟁성ELISA증실해항체대Aβ40적결합표위위우단백안기단적1도16개안기산내. 결론: 이용서균체항체고기술가성공제비Aβ태특이성scFv,위AD환자적림상진단화피동면역치료제공료일충신적가공선택적도경.
