中华口腔医学研究杂志(电子版)
中華口腔醫學研究雜誌(電子版)
중화구강의학연구잡지(전자판)
CHINESE JOURNAL OF STOMATOLOGICAL RESEARCH(ELECTRONIC VERSION)
2011年
1期
26-36
,共11页
陈亦阳%陈沐%汪淼%侯劲松%黄洪章
陳亦暘%陳沐%汪淼%侯勁鬆%黃洪章
진역양%진목%왕묘%후경송%황홍장
腭裂%TGFβ3基因%Smad2基因%信号通路%RNA干扰
腭裂%TGFβ3基因%Smad2基因%信號通路%RNA榦擾
악렬%TGFβ3기인%Smad2기인%신호통로%RNA간우
目的 探讨在胚鼠腭突培养细胞中应用StealthTM RNAi转染有效沉默转化生长因子β3(TGFβ3)基因的可行性.方法 采用Bal b/c近交系小鼠在交配后第14天取胚鼠腭突,离散后进行细胞培养,应用相差显微、MTT法观察传代细胞的形态和生物学特性.采用化学合成的StealthTM RNAi抑制原代胚鼠腭突上皮细胞和间充质细胞内源性TGFβ3 mRNA表达,检测作用24、48、72 h后,TGFβ3、Smad2、BMP2三种基因的表达情况.结果 经过本实验设计的StealthTM RNAi干扰的胚鼠腭突培养细胞中,TGFβ3基因的mRNA和蛋白表达明显降低,但沉默效果随时问有减弱趋势.Smad2基因的mRNA和蛋白表达均随着TGFβ3基因的沉默而减低;但BMP2基因的表达无显著性的改变.结论 StealthTM RNAi能有效地沉默TGFβ3阳基因,并下调Smad2基因的表达,但对BMP2基因表达无明确影响.
目的 探討在胚鼠腭突培養細胞中應用StealthTM RNAi轉染有效沉默轉化生長因子β3(TGFβ3)基因的可行性.方法 採用Bal b/c近交繫小鼠在交配後第14天取胚鼠腭突,離散後進行細胞培養,應用相差顯微、MTT法觀察傳代細胞的形態和生物學特性.採用化學閤成的StealthTM RNAi抑製原代胚鼠腭突上皮細胞和間充質細胞內源性TGFβ3 mRNA錶達,檢測作用24、48、72 h後,TGFβ3、Smad2、BMP2三種基因的錶達情況.結果 經過本實驗設計的StealthTM RNAi榦擾的胚鼠腭突培養細胞中,TGFβ3基因的mRNA和蛋白錶達明顯降低,但沉默效果隨時問有減弱趨勢.Smad2基因的mRNA和蛋白錶達均隨著TGFβ3基因的沉默而減低;但BMP2基因的錶達無顯著性的改變.結論 StealthTM RNAi能有效地沉默TGFβ3暘基因,併下調Smad2基因的錶達,但對BMP2基因錶達無明確影響.
목적 탐토재배서악돌배양세포중응용StealthTM RNAi전염유효침묵전화생장인자β3(TGFβ3)기인적가행성.방법 채용Bal b/c근교계소서재교배후제14천취배서악돌,리산후진행세포배양,응용상차현미、MTT법관찰전대세포적형태화생물학특성.채용화학합성적StealthTM RNAi억제원대배서악돌상피세포화간충질세포내원성TGFβ3 mRNA표체,검측작용24、48、72 h후,TGFβ3、Smad2、BMP2삼충기인적표체정황.결과 경과본실험설계적StealthTM RNAi간우적배서악돌배양세포중,TGFβ3기인적mRNA화단백표체명현강저,단침묵효과수시문유감약추세.Smad2기인적mRNA화단백표체균수착TGFβ3기인적침묵이감저;단BMP2기인적표체무현저성적개변.결론 StealthTM RNAi능유효지침묵TGFβ3양기인,병하조Smad2기인적표체,단대BMP2기인표체무명학영향.