湖北医药学院学报
湖北醫藥學院學報
호북의약학원학보
JOURNAL OF HUBAI UNIVERSITY OF MEDICINE
2011年
1期
11-15
,共5页
王斌%宋军%孙泽群%李平飞%徐少勇
王斌%宋軍%孫澤群%李平飛%徐少勇
왕빈%송군%손택군%리평비%서소용
Skp2%RNAi%食管癌%p27%Bcl-2
Skp2%RNAi%食管癌%p27%Bcl-2
Skp2%RNAi%식관암%p27%Bcl-2
目的:研究siRNA抑制Skp2基因在食管癌细胞中表达,探讨Skp2在肿瘤发生过程中的作用.方法:在skp2基因编码区选择4个RNAi作用位点,体外合成前体DNA链,复性后连入逆转录病毒载体pSUPER-retro (pRS),转染包装细胞PT67,收集含病毒颗粒的培养上清感染食管癌Eca-109细胞,经嘌呤霉素筛选并扩大培养后形成稳定克隆.流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR和免疫印迹法检测Eca-109细胞内Skp2 mRNA、p27和Bcl-2表达.结果:与正常细胞和空载细胞相比,筛选得到的2个克隆细胞Skp2 mRNA表达水平下降(P<0.01),p27表达增高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05).结论:skp2 siRNA促进食管癌细胞凋亡与p27上调有关.
目的:研究siRNA抑製Skp2基因在食管癌細胞中錶達,探討Skp2在腫瘤髮生過程中的作用.方法:在skp2基因編碼區選擇4箇RNAi作用位點,體外閤成前體DNA鏈,複性後連入逆轉錄病毒載體pSUPER-retro (pRS),轉染包裝細胞PT67,收集含病毒顆粒的培養上清感染食管癌Eca-109細胞,經嘌呤黴素篩選併擴大培養後形成穩定剋隆.流式細胞儀檢測細胞凋亡情況,RT-PCR和免疫印跡法檢測Eca-109細胞內Skp2 mRNA、p27和Bcl-2錶達.結果:與正常細胞和空載細胞相比,篩選得到的2箇剋隆細胞Skp2 mRNA錶達水平下降(P<0.01),p27錶達增高(P<0.05),Bcl-2錶達降低(P<0.05),細胞凋亡增加(P<0.05).結論:skp2 siRNA促進食管癌細胞凋亡與p27上調有關.
목적:연구siRNA억제Skp2기인재식관암세포중표체,탐토Skp2재종류발생과정중적작용.방법:재skp2기인편마구선택4개RNAi작용위점,체외합성전체DNA련,복성후련입역전록병독재체pSUPER-retro (pRS),전염포장세포PT67,수집함병독과립적배양상청감염식관암Eca-109세포,경표령매소사선병확대배양후형성은정극륭.류식세포의검측세포조망정황,RT-PCR화면역인적법검측Eca-109세포내Skp2 mRNA、p27화Bcl-2표체.결과:여정상세포화공재세포상비,사선득도적2개극륭세포Skp2 mRNA표체수평하강(P<0.01),p27표체증고(P<0.05),Bcl-2표체강저(P<0.05),세포조망증가(P<0.05).결론:skp2 siRNA촉진식관암세포조망여p27상조유관.
