CAJ | 학술논문

采用银染mRNA差异显示方法从绍鸭卵巢等级卯泡中分离并筛选到3个差异表达序列标签(ExpressedSequence Tags,ESTs)SXDF0201(271 bp)、SXDF0202(200 bp)和SXDF0203(173 bp),通过测序和BLAST检索,发现SXDF0201与GenBank中登录的所有物种的所有序列均无同源性,是在绍鸭卵巢卵泡发现的新EST,现已登录GenBank(GenBank登录号:CB072629),而SXDF0202和SXDF0203则分别与GenBank公布的鸡的EST和肌胃肌球蛋白重链高度同源.用5'-RACE将SXDF0201延伸至544 bp,经过BLAST再次检索,仍然未发现中度同源序列.采用相对定量RT-PCR方法进一步研究SXDF0201和SXDF0202在绍鸭组织中的时空特异性表达,发现这两个EST在产蛋高峰期绍兴鸭的下丘脑、垂体、肌肉、肝脏、脂肪等组织都有表达;SXDF0201在30日龄卵巢的表达水平显著高于60(P＜0.05)和90(P=0.015)日龄;而SXDF0202在卵巢发育的不同阶段的表达水平没有变化;SXDF0201在卵巢卵泡颗粒层中的表达总体高于膜层,SXDF0202在颗粒层中的表达F3＞F5＞Fw(P＜0.01),而在F1卵泡降至最低(P＜0.01),膜层中以Fw卵泡表达水平最高(P＜0.01).
채용은염mRNA차이현시방법종소압란소등급묘포중분리병사선도3개차이표체서렬표첨(ExpressedSequence Tags,ESTs)SXDF0201(271 bp)、SXDF0202(200 bp)화SXDF0203(173 bp),통과측서화BLAST검색,발현SXDF0201여GenBank중등록적소유물충적소유서렬균무동원성,시재소압란소란포발현적신EST,현이등록GenBank(GenBank등록호:CB072629),이SXDF0202화SXDF0203칙분별여GenBank공포적계적EST화기위기구단백중련고도동원.용5'-RACE장SXDF0201연신지544 bp,경과BLAST재차검색,잉연미발현중도동원서렬.채용상대정량RT-PCR방법진일보연구SXDF0201화SXDF0202재소압조직중적시공특이성표체,발현저량개EST재산단고봉기소흥압적하구뇌、수체、기육、간장、지방등조직도유표체;SXDF0201재30일령란소적표체수평현저고우60(P＜0.05)화90(P=0.015)일령;이SXDF0202재란소발육적불동계단적표체수평몰유변화;SXDF0201재란소란포과립층중적표체총체고우막층,SXDF0202재과립층중적표체F3＞F5＞Fw(P＜0.01),이재F1란포강지최저(P＜0.01),막층중이Fw란포표체수평최고(P＜0.01).