上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2006年
3期
233-236
,共4页
顾俊%王长谦%范华骅%聂晓绚%何奔%王彬尧%黄定九
顧俊%王長謙%範華驊%聶曉絢%何奔%王彬堯%黃定九
고준%왕장겸%범화화%섭효현%하분%왕빈요%황정구
内皮祖细胞%内皮细胞%血管新生
內皮祖細胞%內皮細胞%血管新生
내피조세포%내피세포%혈관신생
目的从人外周血中分离、培养和鉴定内皮祖细胞(EPCs),并观察其在体外增殖分化过程中各种细胞表型的变化.方法采用密度梯度离心方法获得外周血单个核细胞,体外进行诱导、分化和扩增,于培养第7天选择免疫荧光(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)鉴定EPCs,并且用流式细胞仪和RT-PCR方法观察上述细胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的表达变化.结果外周血单个核细胞在培养过程中出现梭形贴壁和铺路石样等形态;第7天免疫荧光染色表明,约70%的细胞呈双荧光阳性;流式细胞仪分析显示,CD31和KDR表达在体外培养过程中逐渐升高,至第21天分别达到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天达到高峰(38.0±13.4)%后,第21天下降为(28.3%±12.2)%;RT-PCR结果表明,第4、10和21天eNOS的表达逐渐增强.结论本试验成功从外周血单个核细胞中分离培养出EPCs,在其体外扩增分化为成熟内皮细胞的过程中,CD31、KDR和eNOS等内皮细胞标志表达逐渐增强,而CD34的表达在内皮祖细胞的成熟分化过程中略有下降.
目的從人外週血中分離、培養和鑒定內皮祖細胞(EPCs),併觀察其在體外增殖分化過程中各種細胞錶型的變化.方法採用密度梯度離心方法穫得外週血單箇覈細胞,體外進行誘導、分化和擴增,于培養第7天選擇免疫熒光(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)鑒定EPCs,併且用流式細胞儀和RT-PCR方法觀察上述細胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的錶達變化.結果外週血單箇覈細胞在培養過程中齣現梭形貼壁和鋪路石樣等形態;第7天免疫熒光染色錶明,約70%的細胞呈雙熒光暘性;流式細胞儀分析顯示,CD31和KDR錶達在體外培養過程中逐漸升高,至第21天分彆達到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天達到高峰(38.0±13.4)%後,第21天下降為(28.3%±12.2)%;RT-PCR結果錶明,第4、10和21天eNOS的錶達逐漸增彊.結論本試驗成功從外週血單箇覈細胞中分離培養齣EPCs,在其體外擴增分化為成熟內皮細胞的過程中,CD31、KDR和eNOS等內皮細胞標誌錶達逐漸增彊,而CD34的錶達在內皮祖細胞的成熟分化過程中略有下降.
목적종인외주혈중분리、배양화감정내피조세포(EPCs),병관찰기재체외증식분화과정중각충세포표형적변화.방법채용밀도제도리심방법획득외주혈단개핵세포,체외진행유도、분화화확증,우배양제7천선택면역형광(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)감정EPCs,병차용류식세포의화RT-PCR방법관찰상술세포재제0、4、10화21천적CD34、CD31、KDR화eNOS적표체변화.결과외주혈단개핵세포재배양과정중출현사형첩벽화포로석양등형태;제7천면역형광염색표명,약70%적세포정쌍형광양성;류식세포의분석현시,CD31화KDR표체재체외배양과정중축점승고,지제21천분별체도(72.1±11.2)%화(81.0±12.5)%,이CD34재제10천체도고봉(38.0±13.4)%후,제21천하강위(28.3%±12.2)%;RT-PCR결과표명,제4、10화21천eNOS적표체축점증강.결론본시험성공종외주혈단개핵세포중분리배양출EPCs,재기체외확증분화위성숙내피세포적과정중,CD31、KDR화eNOS등내피세포표지표체축점증강,이CD34적표체재내피조세포적성숙분화과정중략유하강.
