首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2009年
6期
760-765
,共6页
翟梦瑶%高志强%梁英娟%沈鹏
翟夢瑤%高誌彊%樑英娟%瀋鵬
적몽요%고지강%량영연%침붕
膝状神经节%螺旋神经节%细胞培养%豚鼠
膝狀神經節%螺鏇神經節%細胞培養%豚鼠
슬상신경절%라선신경절%세포배양%돈서
目的 对比不同培养条件下膝状神经节细胞(geniculate ganglion cells,GGCs)和螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGCs)的体外生长情况以确定适宜的体外培养条件.方法 解剖成年豚鼠颞骨内段面神经和耳螺旋神经节,采用0.25%胰酶或1 g/L Ⅰ型胶原酶消化,随后用无血清培养基(DMEM/F12+B27)或含有阿糖胞苷(Ara-C)的低浓度血清培养基(DMEM/F12+胎牛血清)进行培养.光学显微镜下观察细胞生长情况,用免疫荧光法鉴定神经细胞.结果 使用DMEM/F12培养基添加B27或添加低浓度血清与Ara-C都可以在体外成功培养GGCs与SGCs,细胞接种48 h内可以贴壁生长,形成典型神经元形态.与无血清培养法相比,含有阿糖胞苷的低浓度血清培养组的细胞衰退现象出现较早,非神经元细胞的生长更加显著.得到的细胞经鼠抗神经元细胞核蛋白单克隆抗体免疫荧光反应证实为GGCs与SGCs.结论 采用联合有丝分裂抑制剂的低浓度血清培养法或无血清培养法都可以成功培养成熟GGCs和SGCs,为体外研究面神经和内耳疾病提供了重要的实验材料.
目的 對比不同培養條件下膝狀神經節細胞(geniculate ganglion cells,GGCs)和螺鏇神經節細胞(spiral ganglion cells,SGCs)的體外生長情況以確定適宜的體外培養條件.方法 解剖成年豚鼠顳骨內段麵神經和耳螺鏇神經節,採用0.25%胰酶或1 g/L Ⅰ型膠原酶消化,隨後用無血清培養基(DMEM/F12+B27)或含有阿糖胞苷(Ara-C)的低濃度血清培養基(DMEM/F12+胎牛血清)進行培養.光學顯微鏡下觀察細胞生長情況,用免疫熒光法鑒定神經細胞.結果 使用DMEM/F12培養基添加B27或添加低濃度血清與Ara-C都可以在體外成功培養GGCs與SGCs,細胞接種48 h內可以貼壁生長,形成典型神經元形態.與無血清培養法相比,含有阿糖胞苷的低濃度血清培養組的細胞衰退現象齣現較早,非神經元細胞的生長更加顯著.得到的細胞經鼠抗神經元細胞覈蛋白單剋隆抗體免疫熒光反應證實為GGCs與SGCs.結論 採用聯閤有絲分裂抑製劑的低濃度血清培養法或無血清培養法都可以成功培養成熟GGCs和SGCs,為體外研究麵神經和內耳疾病提供瞭重要的實驗材料.
목적 대비불동배양조건하슬상신경절세포(geniculate ganglion cells,GGCs)화라선신경절세포(spiral ganglion cells,SGCs)적체외생장정황이학정괄의적체외배양조건.방법 해부성년돈서섭골내단면신경화이라선신경절,채용0.25%이매혹1 g/L Ⅰ형효원매소화,수후용무혈청배양기(DMEM/F12+B27)혹함유아당포감(Ara-C)적저농도혈청배양기(DMEM/F12+태우혈청)진행배양.광학현미경하관찰세포생장정황,용면역형광법감정신경세포.결과 사용DMEM/F12배양기첨가B27혹첨가저농도혈청여Ara-C도가이재체외성공배양GGCs여SGCs,세포접충48 h내가이첩벽생장,형성전형신경원형태.여무혈청배양법상비,함유아당포감적저농도혈청배양조적세포쇠퇴현상출현교조,비신경원세포적생장경가현저.득도적세포경서항신경원세포핵단백단극륭항체면역형광반응증실위GGCs여SGCs.결론 채용연합유사분렬억제제적저농도혈청배양법혹무혈청배양법도가이성공배양성숙GGCs화SGCs,위체외연구면신경화내이질병제공료중요적실험재료.
