时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2010年
6期
1501-1503
,共3页
李喜凤%杜云锋%张红梅%郝哲%许闽%白雁
李喜鳳%杜雲鋒%張紅梅%郝哲%許閩%白雁
리희봉%두운봉%장홍매%학철%허민%백안
蒲公英%基因组DNA提取%随机扩增多态性DNA技术
蒲公英%基因組DNA提取%隨機擴增多態性DNA技術
포공영%기인조DNA제취%수궤확증다태성DNA기술
目的 建立并优化蒲公英样品总DNA提取方法及其RAPD-PCR反应体系.方法 采用改良的CTAB法提取基因组DNA,对蒲公英RAPD-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选.结果 建立了多态性高、重复性好、可用于蒲公英RAPD分析的最佳反应体系.25 μl反应体系中含有:1×Taq Mix buffer,50 ng DNA模板,0.4 μmol/L 引物,1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,1.25U Taq酶.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,38℃复性1 min,72℃延伸2 min,共40个循环;72℃延伸10 min,反应结束后,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用RAPD标记技术进行蒲公英鉴定及种质资源遗传多样性分析奠定了基础.
目的 建立併優化蒲公英樣品總DNA提取方法及其RAPD-PCR反應體繫.方法 採用改良的CTAB法提取基因組DNA,對蒲公英RAPD-PCR反應體繫中各箇主要影響因子進行瞭優化和篩選.結果 建立瞭多態性高、重複性好、可用于蒲公英RAPD分析的最佳反應體繫.25 μl反應體繫中含有:1×Taq Mix buffer,50 ng DNA模闆,0.4 μmol/L 引物,1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,1.25U Taq酶.擴增程序為:94℃預變性5 min;94℃變性1 min,38℃複性1 min,72℃延伸2 min,共40箇循環;72℃延伸10 min,反應結束後,4℃保存.結論 這一優化體繫的建立為今後利用RAPD標記技術進行蒲公英鑒定及種質資源遺傳多樣性分析奠定瞭基礎.
목적 건립병우화포공영양품총DNA제취방법급기RAPD-PCR반응체계.방법 채용개량적CTAB법제취기인조DNA,대포공영RAPD-PCR반응체계중각개주요영향인자진행료우화화사선.결과 건립료다태성고、중복성호、가용우포공영RAPD분석적최가반응체계.25 μl반응체계중함유:1×Taq Mix buffer,50 ng DNA모판,0.4 μmol/L 인물,1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,1.25U Taq매.확증정서위:94℃예변성5 min;94℃변성1 min,38℃복성1 min,72℃연신2 min,공40개순배;72℃연신10 min,반응결속후,4℃보존.결론 저일우화체계적건립위금후이용RAPD표기기술진행포공영감정급충질자원유전다양성분석전정료기출.
