医药导报
醫藥導報
의약도보
HERALD OF MEDICINE
2012年
1期
5-8
,共4页
5-氮-2'脱氧胞苷%CDH13基因%肺癌%DNA甲基化
5-氮-2'脫氧胞苷%CDH13基因%肺癌%DNA甲基化
5-담-2'탈양포감%CDH13기인%폐암%DNA갑기화
目的 观察去甲基化制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)对人肺癌细胞系A549和LTEP-a2中CDH13基因启动子区甲基化状态及表达的影响,探讨肺癌细胞CDH13基因失活的机制及去甲基化制剂对CDH13基因表达的调控作用.方法 5-Aza-dC处理体外培养的肺癌细胞A549、LTEP-a2及正常肺细胞系HFL1后,用甲基化特异性 PCR( MSP) 法检测处理前后细胞中CDH13基因的甲基化状态,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测用药前后细胞中CDH13 mRNA表达的变化.结果 正常肺细胞中未见CDH13启动子甲基化,肺癌细胞A549、LTEP-a2均发现CDH13启动子甲基化现象;应用 5-Aza-dC能使 CDH13基因启动子区 CpG 岛发生去甲基化.肺癌细胞A549、LTEP-a2均可见CDH13 mRNA表达,但与正常肺细胞比较表达较弱,经药物处理癌细胞后其CDH13 mRNA的表达较前明显增强.结论 启动子区异常甲基化是肺癌细胞CDH13基因失活的主要原因之一,去甲基化制剂5-Aza-dC能完全逆转CDH13基因甲基化状态,从而调控CDH13基因表达.
目的 觀察去甲基化製劑5-氮-2'脫氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)對人肺癌細胞繫A549和LTEP-a2中CDH13基因啟動子區甲基化狀態及錶達的影響,探討肺癌細胞CDH13基因失活的機製及去甲基化製劑對CDH13基因錶達的調控作用.方法 5-Aza-dC處理體外培養的肺癌細胞A549、LTEP-a2及正常肺細胞繫HFL1後,用甲基化特異性 PCR( MSP) 法檢測處理前後細胞中CDH13基因的甲基化狀態,半定量逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法檢測用藥前後細胞中CDH13 mRNA錶達的變化.結果 正常肺細胞中未見CDH13啟動子甲基化,肺癌細胞A549、LTEP-a2均髮現CDH13啟動子甲基化現象;應用 5-Aza-dC能使 CDH13基因啟動子區 CpG 島髮生去甲基化.肺癌細胞A549、LTEP-a2均可見CDH13 mRNA錶達,但與正常肺細胞比較錶達較弱,經藥物處理癌細胞後其CDH13 mRNA的錶達較前明顯增彊.結論 啟動子區異常甲基化是肺癌細胞CDH13基因失活的主要原因之一,去甲基化製劑5-Aza-dC能完全逆轉CDH13基因甲基化狀態,從而調控CDH13基因錶達.
목적 관찰거갑기화제제5-담-2'탈양포감(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)대인폐암세포계A549화LTEP-a2중CDH13기인계동자구갑기화상태급표체적영향,탐토폐암세포CDH13기인실활적궤제급거갑기화제제대CDH13기인표체적조공작용.방법 5-Aza-dC처리체외배양적폐암세포A549、LTEP-a2급정상폐세포계HFL1후,용갑기화특이성 PCR( MSP) 법검측처리전후세포중CDH13기인적갑기화상태,반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)법검측용약전후세포중CDH13 mRNA표체적변화.결과 정상폐세포중미견CDH13계동자갑기화,폐암세포A549、LTEP-a2균발현CDH13계동자갑기화현상;응용 5-Aza-dC능사 CDH13기인계동자구 CpG 도발생거갑기화.폐암세포A549、LTEP-a2균가견CDH13 mRNA표체,단여정상폐세포비교표체교약,경약물처리암세포후기CDH13 mRNA적표체교전명현증강.결론 계동자구이상갑기화시폐암세포CDH13기인실활적주요원인지일,거갑기화제제5-Aza-dC능완전역전CDH13기인갑기화상태,종이조공CDH13기인표체.
