CAJ | 학술논문

目的研究小同功型人硒蛋白P(HSelP)的作用.方法克隆HSelP小同功型基因,将位于N端40位的硒半胱氨酸(SeCys)突变为半胱氨酸,测序确定后,在感受态大肠杆菌BL21中大量表达,表达产物HSelP280m用阴离子交换层析纯化,Western blot方法鉴定.提取小鼠肝细胞线粒体,通过荧光光谱仪检测线粒体悬液90°光散射强度和罗丹明123荧光光度变化,确定不同浓度HSelP280m引起的线粒体膜透过性转运孔(PTP)开放程度和线粒体跨膜电位的变化.结果成功地将HSelP小同功型中SeCys点突变为半胱氨酸,在原核表达系统中获得大量表达.表达产物纯化后纯度达90%以上.HSelP280m可促进线粒体PTP开放,跨膜电位下降,且有剂量依赖关系,可被PTP的特异抑制剂所抑制.此作用在去除N端40个氨基酸后丧失.结论 HSelP280m有促进线粒体PTP开放的作用,为进一步研究HSelP的结构和功能提供了线索.
목적연구소동공형인서단백P(HSelP)적작용.방법극륭HSelP소동공형기인,장위우N단40위적서반광안산(SeCys)돌변위반광안산,측서학정후,재감수태대장간균BL21중대량표체,표체산물HSelP280m용음리자교환층석순화,Western blot방법감정.제취소서간세포선립체,통과형광광보의검측선립체현액90°광산사강도화라단명123형광광도변화,학정불동농도HSelP280m인기적선립체막투과성전운공(PTP)개방정도화선립체과막전위적변화.결과성공지장HSelP소동공형중SeCys점돌변위반광안산,재원핵표체계통중획득대량표체.표체산물순화후순도체90%이상.HSelP280m가촉진선립체PTP개방,과막전위하강,차유제량의뢰관계,가피PTP적특이억제제소억제.차작용재거제N단40개안기산후상실.결론 HSelP280m유촉진선립체PTP개방적작용,위진일보연구HSelP적결구화공능제공료선색.