中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2004年
6期
762-767
,共6页
刘雨飞%丁丽华%郝春芳%方言%赵福弟%黄翠芬%杨晓%叶棋浓
劉雨飛%丁麗華%郝春芳%方言%趙福弟%黃翠芬%楊曉%葉棋濃
류우비%정려화%학춘방%방언%조복제%황취분%양효%협기농
人X盒结合蛋白1(XBP-1),融合表达,多克隆抗体
人X盒結閤蛋白1(XBP-1),融閤錶達,多剋隆抗體
인X합결합단백1(XBP-1),융합표체,다극륭항체
人X盒结合蛋白1(XBP-1)为一种转录因子,与多种肿瘤的发生、发展有密切关系.XBP-1有2种剪切形式,即XBP-1S和XBP-1U.将这2种剪切形式中的一段相同编码序列(编码82～147位氨基酸)重组于谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-KG中,构建成重组质粒pGST-XBP1(82～147位氨基酸).将该重组质粒转化E.coli DH5α后,表达GST-XBP-1(82～147位氨基酸)融合蛋白,经谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析获得纯化的融合蛋白.用此融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体.利用制备的抗体分别用Western印迹和免疫细胞化学检测XBP-1的2种剪切形式在哺乳动物细胞中的表达.结果表明,该抗体对XBP-1的2种剪切形式均具有反应原性,效价高,特异性好,可以用于进一步研究XBP-1的功能.
人X盒結閤蛋白1(XBP-1)為一種轉錄因子,與多種腫瘤的髮生、髮展有密切關繫.XBP-1有2種剪切形式,即XBP-1S和XBP-1U.將這2種剪切形式中的一段相同編碼序列(編碼82～147位氨基痠)重組于穀胱甘肽S轉移酶(GST)融閤蛋白錶達載體pGEX-KG中,構建成重組質粒pGST-XBP1(82～147位氨基痠).將該重組質粒轉化E.coli DH5α後,錶達GST-XBP-1(82～147位氨基痠)融閤蛋白,經穀胱甘肽-Sepharose 4B親和層析穫得純化的融閤蛋白.用此融閤蛋白免疫傢兔製備多剋隆抗體.利用製備的抗體分彆用Western印跡和免疫細胞化學檢測XBP-1的2種剪切形式在哺乳動物細胞中的錶達.結果錶明,該抗體對XBP-1的2種剪切形式均具有反應原性,效價高,特異性好,可以用于進一步研究XBP-1的功能.
인X합결합단백1(XBP-1)위일충전록인자,여다충종류적발생、발전유밀절관계.XBP-1유2충전절형식,즉XBP-1S화XBP-1U.장저2충전절형식중적일단상동편마서렬(편마82～147위안기산)중조우곡광감태S전이매(GST)융합단백표체재체pGEX-KG중,구건성중조질립pGST-XBP1(82～147위안기산).장해중조질립전화E.coli DH5α후,표체GST-XBP-1(82～147위안기산)융합단백,경곡광감태-Sepharose 4B친화층석획득순화적융합단백.용차융합단백면역가토제비다극륭항체.이용제비적항체분별용Western인적화면역세포화학검측XBP-1적2충전절형식재포유동물세포중적표체.결과표명,해항체대XBP-1적2충전절형식균구유반응원성,효개고,특이성호,가이용우진일보연구XBP-1적공능.
