作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2005年
1期
108-113
,共6页
赵福永%谢龙旭%田颖川%徐培林
趙福永%謝龍旭%田穎川%徐培林
조복영%사룡욱%전영천%서배림
转基因棉花%草甘膦%aroAM12基因%Bts1m基因%选择标记
轉基因棉花%草甘膦%aroAM12基因%Bts1m基因%選擇標記
전기인면화%초감련%aroAM12기인%Bts1m기인%선택표기
构建了一种新的植物高效表达载体pAM12-s1m,其上携带有通过基因优化(gene shuffling)技术获得的抗草甘膦突变基因(aroAM12)和抗虫人工合成重组Bt基因(Bts1m).aroAM12基因表达由CaMV35S启动子控制,Bts1m基因表达由2E-35S启动子和Ω因子控制.以棉花无菌苗下胚轴为外植体,采用农杆菌介导法将aroAM12和Bts1m基因导入棉花品种石远321中,以aroAM12基因作为选择标记,草甘膦为选择剂直接筛选获得52棵再生植株.PCR和Southern blot分析表明再生植株均整合有aroAM12基因,其中38棵植株同时整合有aroAM12和Bts1m基因.Northern blot、Western blot分析进一步证明整合到植株中的两个基因在转录和翻译水平上进行了有效表达.离体叶片草甘膦抗性和虫试实验证明,获得的转基因棉花对草甘膦和棉铃虫具有较强的抗性.
構建瞭一種新的植物高效錶達載體pAM12-s1m,其上攜帶有通過基因優化(gene shuffling)技術穫得的抗草甘膦突變基因(aroAM12)和抗蟲人工閤成重組Bt基因(Bts1m).aroAM12基因錶達由CaMV35S啟動子控製,Bts1m基因錶達由2E-35S啟動子和Ω因子控製.以棉花無菌苗下胚軸為外植體,採用農桿菌介導法將aroAM12和Bts1m基因導入棉花品種石遠321中,以aroAM12基因作為選擇標記,草甘膦為選擇劑直接篩選穫得52棵再生植株.PCR和Southern blot分析錶明再生植株均整閤有aroAM12基因,其中38棵植株同時整閤有aroAM12和Bts1m基因.Northern blot、Western blot分析進一步證明整閤到植株中的兩箇基因在轉錄和翻譯水平上進行瞭有效錶達.離體葉片草甘膦抗性和蟲試實驗證明,穫得的轉基因棉花對草甘膦和棉鈴蟲具有較彊的抗性.
구건료일충신적식물고효표체재체pAM12-s1m,기상휴대유통과기인우화(gene shuffling)기술획득적항초감련돌변기인(aroAM12)화항충인공합성중조Bt기인(Bts1m).aroAM12기인표체유CaMV35S계동자공제,Bts1m기인표체유2E-35S계동자화Ω인자공제.이면화무균묘하배축위외식체,채용농간균개도법장aroAM12화Bts1m기인도입면화품충석원321중,이aroAM12기인작위선택표기,초감련위선택제직접사선획득52과재생식주.PCR화Southern blot분석표명재생식주균정합유aroAM12기인,기중38과식주동시정합유aroAM12화Bts1m기인.Northern blot、Western blot분석진일보증명정합도식주중적량개기인재전록화번역수평상진행료유효표체.리체협편초감련항성화충시실험증명,획득적전기인면화대초감련화면령충구유교강적항성.
