时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2008年
3期
567-569
,共3页
赵振华%严萍%焦旭雯%赵树进
趙振華%嚴萍%焦旭雯%趙樹進
조진화%엄평%초욱문%조수진
何首乌%简单重复序列区间扩增多太性%反应体系%建立与优化
何首烏%簡單重複序列區間擴增多太性%反應體繫%建立與優化
하수오%간단중복서렬구간확증다태성%반응체계%건립여우화
目的 建立和优化ISSR-PCR反应体系.方法 通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序.
目的 建立和優化ISSR-PCR反應體繫.方法 通過單因素實驗研究ISSR反應體繫中主要成分(模闆、Taq DNA聚閤酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火溫度對擴增結果的影響.結果 建立瞭適閤何首烏ISSR分析的反應體繫和擴增程序,即在25μl反應體繫中,內含1×Taq酶配套緩遲液、100ng模闆、1.5 U Taq DNA聚閤酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.擴增程序為94℃預變性5 min;然後是94℃變性45s,(據不同引物的退火溫度)複性1 min,72℃延伸1.5 min,共35箇循環;72℃延伸7 min,4℃保存.結論 這一優化體繫的建立為今後利用ISSR標記技術進行何首烏鑒定及種質資源遺傳多樣性分析提供瞭一箇標準化程序.
목적 건립화우화ISSR-PCR반응체계.방법 통과단인소실험연구ISSR반응체계중주요성분(모판、Taq DNA취합매、Mg2+、인물、dNTPs)이급퇴화온도대확증결과적영향.결과 건립료괄합하수오ISSR분석적반응체계화확증정서,즉재25μl반응체계중,내함1×Taq매배투완충액、100ng모판、1.5 U Taq DNA취합매、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L인물、0.2 mmol/L dNTPs.확증정서위94℃예변성5 min;연후시94℃변성45s,(거불동인물적퇴화온도)복성1 min,72℃연신1.5 min,공35개순배;72℃연신7 min,4℃보존.결론 저일우화체계적건립위금후이용ISSR표기기술진행하수오감정급충질자원유전다양성분석제공료일개표준화정서.
