医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2009年
1期
55-57
,共3页
纪仲秋%何大澄%彭安%徐建国%管谷茂%铃木信夫
紀仲鞦%何大澄%彭安%徐建國%管穀茂%鈴木信伕
기중추%하대징%팽안%서건국%관곡무%령목신부
镉%变异%癌因子K-ras%热休克蛋白27
鎘%變異%癌因子K-ras%熱休剋蛋白27
력%변이%암인자K-ras%열휴극단백27
目的 在环境中存在着很多化合物可以引起变异,对于环境的变异原活性的高感度的方法研究是必要的.例如,应用镉对于人体成纤维细胞的致死毒性和变异活性的详细研究报告很少.因此本研究应用紫外线可以检测出的人体细胞变异,用镉处理的重金属镉的变异活性高感度方法能够检测出来,并且活性的特异点进行解明.方法 使用培养的人体细胞RSa和派生株.变异原活性的检测应用OuaR(ouabain resistancn)变异原的检出法和癌遗传因子K-ras的盐基置换的变异的differential dot-blot hybridization检测方法.为了变异诱导的频度的检测,进行了MTT(methyl thiazolyl tetrazoliun)法和生存形成率的测定.变异原活性的机制的解明还应用了Western blot法和siRNA方法对热休克蛋白质进行了解析.结果 应用镉的变异原活性的盐基置换变异的检出和紫外线程度相同.DNA伤害对应着热休克蛋白(HSP)27蛋白质的细胞内的变化,同样变异频度也出现了高的数值.结论 HSP27蛋白高表达的UV'-1细胞比RSa细胞OuaR变异频率要低.用K-ras dot blot方法证明了RSa细胞具有比UV'-1细胞的变异要高.siHSP27细胞观察到OuaR变异的高表达变化以及镉对DNA损伤表现出UV'-1成纤维细胞小于RSa成纤维细胞.
目的 在環境中存在著很多化閤物可以引起變異,對于環境的變異原活性的高感度的方法研究是必要的.例如,應用鎘對于人體成纖維細胞的緻死毒性和變異活性的詳細研究報告很少.因此本研究應用紫外線可以檢測齣的人體細胞變異,用鎘處理的重金屬鎘的變異活性高感度方法能夠檢測齣來,併且活性的特異點進行解明.方法 使用培養的人體細胞RSa和派生株.變異原活性的檢測應用OuaR(ouabain resistancn)變異原的檢齣法和癌遺傳因子K-ras的鹽基置換的變異的differential dot-blot hybridization檢測方法.為瞭變異誘導的頻度的檢測,進行瞭MTT(methyl thiazolyl tetrazoliun)法和生存形成率的測定.變異原活性的機製的解明還應用瞭Western blot法和siRNA方法對熱休剋蛋白質進行瞭解析.結果 應用鎘的變異原活性的鹽基置換變異的檢齣和紫外線程度相同.DNA傷害對應著熱休剋蛋白(HSP)27蛋白質的細胞內的變化,同樣變異頻度也齣現瞭高的數值.結論 HSP27蛋白高錶達的UV'-1細胞比RSa細胞OuaR變異頻率要低.用K-ras dot blot方法證明瞭RSa細胞具有比UV'-1細胞的變異要高.siHSP27細胞觀察到OuaR變異的高錶達變化以及鎘對DNA損傷錶現齣UV'-1成纖維細胞小于RSa成纖維細胞.
목적 재배경중존재착흔다화합물가이인기변이,대우배경적변이원활성적고감도적방법연구시필요적.례여,응용력대우인체성섬유세포적치사독성화변이활성적상세연구보고흔소.인차본연구응용자외선가이검측출적인체세포변이,용력처리적중금속력적변이활성고감도방법능구검측출래,병차활성적특이점진행해명.방법 사용배양적인체세포RSa화파생주.변이원활성적검측응용OuaR(ouabain resistancn)변이원적검출법화암유전인자K-ras적염기치환적변이적differential dot-blot hybridization검측방법.위료변이유도적빈도적검측,진행료MTT(methyl thiazolyl tetrazoliun)법화생존형성솔적측정.변이원활성적궤제적해명환응용료Western blot법화siRNA방법대열휴극단백질진행료해석.결과 응용력적변이원활성적염기치환변이적검출화자외선정도상동.DNA상해대응착열휴극단백(HSP)27단백질적세포내적변화,동양변이빈도야출현료고적수치.결론 HSP27단백고표체적UV'-1세포비RSa세포OuaR변이빈솔요저.용K-ras dot blot방법증명료RSa세포구유비UV'-1세포적변이요고.siHSP27세포관찰도OuaR변이적고표체변화이급력대DNA손상표현출UV'-1성섬유세포소우RSa성섬유세포.
