中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2011年
4期
303-306
,共4页
铜绿假单胞菌%OprF%疫苗
銅綠假單胞菌%OprF%疫苗
동록가단포균%OprF%역묘
目的 构建和鉴定铜绿假单胞菌重组双歧杆菌(rBb)-OprF疫苗.方法 以铜绿假单胞菌PAOl标准株提取总RNA为模板,自行设计引物,RT-PCR扩增获得OprF抗原编码基因,经酶切、连接定向克隆入大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-OprF.转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒行酶切电泳和测序验证后,电穿孔转化到Bb中,构建铜绿假单胞菌rBb-OprF疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定.结果 RT-PCR扩增出1 016bp的OprF编码基因;重组质粒经双酶切鉴定,切出4 947bp的载体片段和10 16bp的目的基因片段;以rBb抽提质粒为模板进行PCR扩增可得到1 016bp的oprF基因片段.结论 成功构建了铜绿假单胞菌rBb-OprF疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定基础.
目的 構建和鑒定銅綠假單胞菌重組雙歧桿菌(rBb)-OprF疫苗.方法 以銅綠假單胞菌PAOl標準株提取總RNA為模闆,自行設計引物,RT-PCR擴增穫得OprF抗原編碼基因,經酶切、連接定嚮剋隆入大腸埃希菌-雙歧桿菌穿梭錶達載體pGEX-1λT,構建重組質粒pGEX-OprF.轉化E.coli BL21(DE3)感受態細胞,抽提質粒行酶切電泳和測序驗證後,電穿孔轉化到Bb中,構建銅綠假單胞菌rBb-OprF疫苗,抽提質粒進行PCR擴增鑒定.結果 RT-PCR擴增齣1 016bp的OprF編碼基因;重組質粒經雙酶切鑒定,切齣4 947bp的載體片段和10 16bp的目的基因片段;以rBb抽提質粒為模闆進行PCR擴增可得到1 016bp的oprF基因片段.結論 成功構建瞭銅綠假單胞菌rBb-OprF疫苗,為該疫苗的進一步研究奠定基礎.
목적 구건화감정동록가단포균중조쌍기간균(rBb)-OprF역묘.방법 이동록가단포균PAOl표준주제취총RNA위모판,자행설계인물,RT-PCR확증획득OprF항원편마기인,경매절、련접정향극륭입대장애희균-쌍기간균천사표체재체pGEX-1λT,구건중조질립pGEX-OprF.전화E.coli BL21(DE3)감수태세포,추제질립행매절전영화측서험증후,전천공전화도Bb중,구건동록가단포균rBb-OprF역묘,추제질립진행PCR확증감정.결과 RT-PCR확증출1 016bp적OprF편마기인;중조질립경쌍매절감정,절출4 947bp적재체편단화10 16bp적목적기인편단;이rBb추제질립위모판진행PCR확증가득도1 016bp적oprF기인편단.결론 성공구건료동록가단포균rBb-OprF역묘,위해역묘적진일보연구전정기출.
