CAJ | 학술논문

去甲斑蝥素对高糖刺激的HK-2细胞FN,ColⅣ和TGF-β1mRNA及蛋白表达的影响
거갑반모소대고당자격적HK-2세포FN,ColⅣ화TGF-β1mRNA급단백표체적영향
Effect of norcantharidin on the expression of FN, Col Ⅳ andTGF-β1 mRNA and protein in HK-2 cells induced by high glucose

万方数据

中南大学学报（医学版）中南大學學報（醫學版） 중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2012年 3期 278-284 ,共7页

陈琼%李瑛%罗俊辉%杨阳%李军%孙林%肖力%许向青%彭佑铭%刘伏友

진경%리영%라준휘%양양%리군%손림%초력%허향청%팽우명%류복우

去甲斑蝥素%纤粘连蛋白%胶原Ⅳ%转化生长因子-β1 去甲斑蝥素%纖粘連蛋白%膠原Ⅳ%轉化生長因子-β1
거갑반모소%섬점련단백%효원Ⅳ%전화생장인자-β1

目的:观察去甲斑蝥素(NCTD)对高糖刺激的HK-2细胞外基质和TGF-β1表达的影响.方法:常规培养HK-2细胞,无血清DMEM培养基同步培养24 h,细胞分为正常葡萄糖组(C,D-glucose 5.5 mmol/L)、甘露醇对照组(M,5.5 mmol/L D-glucose+24.5 mmol/L mannitol)、高糖组(HG,30 mmol/L D-glucose)、高糖+NCTD干预组(30 mmol/L D-glucose+0.5～40 mg/L NCTD).台盼蓝排斥实验检测NCTD对高糖刺激的细胞毒性.MTT法检测NCTD对高糖刺激的细胞增殖的影响.收集培养6,24,48 h后细胞总RNA及蛋白,用RT-PCR检测细胞FN,ColⅣ和TGF-β1 mRNA的表达,采用Western印迹检测FN,ColⅣ和TGF-βl蛋白的表达.结果:不同浓度NCTD作用72 h后,浓度超过5 mg/L的NCTD对高糖环境下的HK-2细胞有明显的毒性.RT-PCR和Western印迹结果显示:30 mmol/L D-葡萄糖可引起HK-2细胞FN,ColⅣ和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的升高(P＜0.05),而5 mg/L NCTD可抑制高糖刺激的FN,ColⅣ和TGF-β1的表达(P＜0.05).相同渗透浓度的D-甘露醇组对上述指标均无影响(P＞0.05).结论:NCTD能下调HK-2细胞FN,ColⅣ及TGF-β1的表达.
목적:관찰거갑반모소(NCTD)대고당자격적HK-2세포외기질화TGF-β1표체적영향.방법:상규배양HK-2세포,무혈청DMEM배양기동보배양24 h,세포분위정상포도당조(C,D-glucose 5.5 mmol/L)、감로순대조조(M,5.5 mmol/L D-glucose+24.5 mmol/L mannitol)、고당조(HG,30 mmol/L D-glucose)、고당+NCTD간예조(30 mmol/L D-glucose+0.5～40 mg/L NCTD).태반람배척실험검측NCTD대고당자격적세포독성.MTT법검측NCTD대고당자격적세포증식적영향.수집배양6,24,48 h후세포총RNA급단백,용RT-PCR검측세포FN,ColⅣ화TGF-β1 mRNA적표체,채용Western인적검측FN,ColⅣ화TGF-βl단백적표체.결과:불동농도NCTD작용72 h후,농도초과5 mg/L적NCTD대고당배경하적HK-2세포유명현적독성.RT-PCR화Western인적결과현시:30 mmol/L D-포도당가인기HK-2세포FN,ColⅣ화TGF-β1 mRNA급단백수평적승고(P＜0.05),이5 mg/L NCTD가억제고당자격적FN,ColⅣ화TGF-β1적표체(P＜0.05).상동삼투농도적D-감로순조대상술지표균무영향(P＞0.05).결론:NCTD능하조HK-2세포FN,ColⅣ급TGF-β1적표체.