广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2006年
12期
1783-1785
,共3页
刘世明%李民友%钟赟%吴楚财
劉世明%李民友%鐘赟%吳楚財
류세명%리민우%종빈%오초재
B型钠尿肽%噬菌体展示%抗体库%单链抗体
B型鈉尿肽%噬菌體展示%抗體庫%單鏈抗體
B형납뇨태%서균체전시%항체고%단련항체
目的 利用噬菌体表面展示技术构建抗人B型钠尿肽(BNP)的单链噬菌体抗体库及筛选抗人BNP的特异性单链噬菌体抗体.方法 从正常人外周血淋巴细胞提取总RNA,扩增抗体重链和轻链可变区基因片段,加入连接子并构建单链噬菌体抗体库.用人BNP包被的免疫管筛选噬菌体.经过4轮的富集筛选,从最后一轮噬菌体感染的大肠杆菌TG1中随机挑选20个单菌落,用ELISA方法测定阳性噬菌体抗体,并将这些噬菌体抗体与BSA进行交叉反应试验.结果 ELISA测试表明,20个单菌落中有8株吸光度较高而且交叉反应较弱的阳性噬菌体抗体,DNA测序符合预期目标.结论 成功构建人B型钠尿肽噬菌体抗体库,并筛选出表达人源性BNP单克隆抗体噬菌体,为下一步抗BNP单链抗体的表达纯化及临床应用打下了基础.
目的 利用噬菌體錶麵展示技術構建抗人B型鈉尿肽(BNP)的單鏈噬菌體抗體庫及篩選抗人BNP的特異性單鏈噬菌體抗體.方法 從正常人外週血淋巴細胞提取總RNA,擴增抗體重鏈和輕鏈可變區基因片段,加入連接子併構建單鏈噬菌體抗體庫.用人BNP包被的免疫管篩選噬菌體.經過4輪的富集篩選,從最後一輪噬菌體感染的大腸桿菌TG1中隨機挑選20箇單菌落,用ELISA方法測定暘性噬菌體抗體,併將這些噬菌體抗體與BSA進行交扠反應試驗.結果 ELISA測試錶明,20箇單菌落中有8株吸光度較高而且交扠反應較弱的暘性噬菌體抗體,DNA測序符閤預期目標.結論 成功構建人B型鈉尿肽噬菌體抗體庫,併篩選齣錶達人源性BNP單剋隆抗體噬菌體,為下一步抗BNP單鏈抗體的錶達純化及臨床應用打下瞭基礎.
목적 이용서균체표면전시기술구건항인B형납뇨태(BNP)적단련서균체항체고급사선항인BNP적특이성단련서균체항체.방법 종정상인외주혈림파세포제취총RNA,확증항체중련화경련가변구기인편단,가입련접자병구건단련서균체항체고.용인BNP포피적면역관사선서균체.경과4륜적부집사선,종최후일륜서균체감염적대장간균TG1중수궤도선20개단균락,용ELISA방법측정양성서균체항체,병장저사서균체항체여BSA진행교차반응시험.결과 ELISA측시표명,20개단균락중유8주흡광도교고이차교차반응교약적양성서균체항체,DNA측서부합예기목표.결론 성공구건인B형납뇨태서균체항체고,병사선출표체인원성BNP단극륭항체서균체,위하일보항BNP단련항체적표체순화급림상응용타하료기출.
