西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北農林科技大學學報(自然科學版)
서북농림과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY
2007年
5期
87-91
,共5页
张如佳%王阳%王美南%井金学%李振岐
張如佳%王暘%王美南%井金學%李振岐
장여가%왕양%왕미남%정금학%리진기
小麦条锈菌%基因枪%毒性变异%插入突变
小麥條鏽菌%基因鎗%毒性變異%插入突變
소맥조수균%기인창%독성변이%삽입돌변
为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究.结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h,可裂膜承载压力为1 100 Psi时进行轰击转化,所得的小麦条锈菌夏孢子在含有潮霉素的培养基上萌发率最高,为36.09%.进一步将转化的小麦条锈菌夏孢子进行扩繁,在筛选品种上筛选,将筛选到的突变体在其上继代培养4代,获得了两个稳定的毒性突变菌株MM-2、MM-3.MM2菌株对南大2419的毒性减弱,反应型由野生菌系的4型变为2型;MM3菌株在南大2419的反应型由野生菌系的4型变为2、3型,毒性发生分化.采用中国鉴别寄主对突变体的毒性研究表明,各突变菌株的毒性均较原始菌系发生了明显改变.进一步用Hyg基因特异PCR在两个突变菌系中均扩增到目的片段,表明MM-2、MM-3的突变是由Hyg基因插入引起的.
為瞭得到帶有明確遺傳標記的毒性突變菌株,應用基因鎗轉化技術,以小麥條鏽菌野生白化菌繫為轉化受體,以含有潮黴素抗性基因(Hyg)的質粒為插入載體,對基因鎗介導小麥條鏽菌插入突變的條件進行瞭研究.結果錶明,噹小麥條鏽菌夏孢子萌動2 h,可裂膜承載壓力為1 100 Psi時進行轟擊轉化,所得的小麥條鏽菌夏孢子在含有潮黴素的培養基上萌髮率最高,為36.09%.進一步將轉化的小麥條鏽菌夏孢子進行擴繁,在篩選品種上篩選,將篩選到的突變體在其上繼代培養4代,穫得瞭兩箇穩定的毒性突變菌株MM-2、MM-3.MM2菌株對南大2419的毒性減弱,反應型由野生菌繫的4型變為2型;MM3菌株在南大2419的反應型由野生菌繫的4型變為2、3型,毒性髮生分化.採用中國鑒彆寄主對突變體的毒性研究錶明,各突變菌株的毒性均較原始菌繫髮生瞭明顯改變.進一步用Hyg基因特異PCR在兩箇突變菌繫中均擴增到目的片段,錶明MM-2、MM-3的突變是由Hyg基因插入引起的.
위료득도대유명학유전표기적독성돌변균주,응용기인창전화기술,이소맥조수균야생백화균계위전화수체,이함유조매소항성기인(Hyg)적질립위삽입재체,대기인창개도소맥조수균삽입돌변적조건진행료연구.결과표명,당소맥조수균하포자맹동2 h,가렬막승재압력위1 100 Psi시진행굉격전화,소득적소맥조수균하포자재함유조매소적배양기상맹발솔최고,위36.09%.진일보장전화적소맥조수균하포자진행확번,재사선품충상사선,장사선도적돌변체재기상계대배양4대,획득료량개은정적독성돌변균주MM-2、MM-3.MM2균주대남대2419적독성감약,반응형유야생균계적4형변위2형;MM3균주재남대2419적반응형유야생균계적4형변위2、3형,독성발생분화.채용중국감별기주대돌변체적독성연구표명,각돌변균주적독성균교원시균계발생료명현개변.진일보용Hyg기인특이PCR재량개돌변균계중균확증도목적편단,표명MM-2、MM-3적돌변시유Hyg기인삽입인기적.
