中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
6期
622-626
,共5页
Thapsigarigin%晶状体上皮细胞%细胞凋亡%Caspase3
Thapsigarigin%晶狀體上皮細胞%細胞凋亡%Caspase3
Thapsigarigin%정상체상피세포%세포조망%Caspase3
[目的]研究thapsigargin(TG)对体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖的影响,并探讨其分子机制.[方法]不同浓度TG处理SRA01/04细胞72 h,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖;流式细胞仪(PI法)检测细胞周期改变;透射电镜观察细胞超微结构变化;TUNEL法检测细胞核中DNA的断裂情况;激光共焦显微镜和流式细胞仪检测Caspase3活性亚单位(17/19 ku)的表达及阳性细胞表达率.[结果]MTT法测得TG为0.325～5 μmol/L时,细胞增殖抑制率变化显著,IC50大约为0.8 μmol/L;透射电镜显示TG处理SRA01/04细胞膜皱缩,染色体浓缩、边集、核膜裂解、凋亡小体形成;流式细胞仪(PI法)及TUNEL法检测TG浓度为0,0.1,0.5,1,10 μmol/L分别处理SRA01/04细胞72 h,细胞凋亡率随浓度的增加而增加,呈浓度依赖性;TG处理后细胞Caspase3阳性表达率也呈浓度依赖性增加,TG为10 μmol/L时,几乎每个细胞浆内Caspase3都被激活.[结论]Thapsigargin可能通过激活Caspase3为诱导体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞凋亡而抑制其增殖,TG为预防后发性白内障的药物研究提供了基础.
[目的]研究thapsigargin(TG)對體外培養的人晶狀體上皮細胞繫SRA01/04增殖的影響,併探討其分子機製.[方法]不同濃度TG處理SRA01/04細胞72 h,噻唑藍比色法(MTT)檢測細胞增殖;流式細胞儀(PI法)檢測細胞週期改變;透射電鏡觀察細胞超微結構變化;TUNEL法檢測細胞覈中DNA的斷裂情況;激光共焦顯微鏡和流式細胞儀檢測Caspase3活性亞單位(17/19 ku)的錶達及暘性細胞錶達率.[結果]MTT法測得TG為0.325～5 μmol/L時,細胞增殖抑製率變化顯著,IC50大約為0.8 μmol/L;透射電鏡顯示TG處理SRA01/04細胞膜皺縮,染色體濃縮、邊集、覈膜裂解、凋亡小體形成;流式細胞儀(PI法)及TUNEL法檢測TG濃度為0,0.1,0.5,1,10 μmol/L分彆處理SRA01/04細胞72 h,細胞凋亡率隨濃度的增加而增加,呈濃度依賴性;TG處理後細胞Caspase3暘性錶達率也呈濃度依賴性增加,TG為10 μmol/L時,幾乎每箇細胞漿內Caspase3都被激活.[結論]Thapsigargin可能通過激活Caspase3為誘導體外培養的人晶狀體上皮細胞繫SRA01/04細胞凋亡而抑製其增殖,TG為預防後髮性白內障的藥物研究提供瞭基礎.
[목적]연구thapsigargin(TG)대체외배양적인정상체상피세포계SRA01/04증식적영향,병탐토기분자궤제.[방법]불동농도TG처리SRA01/04세포72 h,새서람비색법(MTT)검측세포증식;류식세포의(PI법)검측세포주기개변;투사전경관찰세포초미결구변화;TUNEL법검측세포핵중DNA적단렬정황;격광공초현미경화류식세포의검측Caspase3활성아단위(17/19 ku)적표체급양성세포표체솔.[결과]MTT법측득TG위0.325～5 μmol/L시,세포증식억제솔변화현저,IC50대약위0.8 μmol/L;투사전경현시TG처리SRA01/04세포막추축,염색체농축、변집、핵막렬해、조망소체형성;류식세포의(PI법)급TUNEL법검측TG농도위0,0.1,0.5,1,10 μmol/L분별처리SRA01/04세포72 h,세포조망솔수농도적증가이증가,정농도의뢰성;TG처리후세포Caspase3양성표체솔야정농도의뢰성증가,TG위10 μmol/L시,궤호매개세포장내Caspase3도피격활.[결론]Thapsigargin가능통과격활Caspase3위유도체외배양적인정상체상피세포계SRA01/04세포조망이억제기증식,TG위예방후발성백내장적약물연구제공료기출.
