生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
3期
376-380
,共5页
姜文国%熊冬生%刘芳%郭红星%苏晔%吕晶丽%杨纯正
薑文國%熊鼕生%劉芳%郭紅星%囌曄%呂晶麗%楊純正
강문국%웅동생%류방%곽홍성%소엽%려정려%양순정
4-1BBL%CD20%靶向治疗%免疫治疗
4-1BBL%CD20%靶嚮治療%免疫治療
4-1BBL%CD20%파향치료%면역치료
研究共刺激分子4-1BBL在肿瘤靶向治疗方面的作用,用PCR和overlap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab'融合蛋白表达载体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用SDS-PAGE和HPLC鉴定纯化产物;采用玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性.DNA序列测定结果表明:人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab'融合蛋白已构建成功.表达可溶性产物的产量达200 μg/L以上,纯度较高.具有与激活的Jurkat(4-1BBL+)和Raji细胞(CD20+)结合的活性.这将为非何杰金氏淋巴瘤免疫治疗、靶向治疗提供新的思路.
研究共刺激分子4-1BBL在腫瘤靶嚮治療方麵的作用,用PCR和overlap PCR方法構建人4-1BBL胞外區/抗CD20 Fab'融閤蛋白錶達載體,併用雙脫氧終止法測定DNA序列;採用親和層析法純化該產物,併用SDS-PAGE和HPLC鑒定純化產物;採用玫瑰花環試驗鑒定純化產物與靶細胞的結閤活性.DNA序列測定結果錶明:人4-1BBL胞外區/抗CD20 Fab'融閤蛋白已構建成功.錶達可溶性產物的產量達200 μg/L以上,純度較高.具有與激活的Jurkat(4-1BBL+)和Raji細胞(CD20+)結閤的活性.這將為非何傑金氏淋巴瘤免疫治療、靶嚮治療提供新的思路.
연구공자격분자4-1BBL재종류파향치료방면적작용,용PCR화overlap PCR방법구건인4-1BBL포외구/항CD20 Fab'융합단백표체재체,병용쌍탈양종지법측정DNA서렬;채용친화층석법순화해산물,병용SDS-PAGE화HPLC감정순화산물;채용매괴화배시험감정순화산물여파세포적결합활성.DNA서렬측정결과표명:인4-1BBL포외구/항CD20 Fab'융합단백이구건성공.표체가용성산물적산량체200 μg/L이상,순도교고.구유여격활적Jurkat(4-1BBL+)화Raji세포(CD20+)결합적활성.저장위비하걸금씨림파류면역치료、파향치료제공신적사로.
