CAJ | 학술논문

在过去的近30年中,转基因技术在哺乳动物基因表达方面研究的应用已经成为实验生物学及应用生物学领域最为显著的进展之一.传统的制作转基因动物方法有显微注射法、逆转录病毒感染法和胚胎干细胞泫等,但每种方法都有其缺陷,限制了其在今后转基因动物研究中的广泛心用.对小鼠体内生殖细胞进行外源基因转染,研究精子形成过程中制作转基因小鼠的效率.首先运用睾丸注射法将被脂质体包裹的绿色荧光蛋白表达载体(pIRES2-EGFP)注射到公鼠睾丸及附睾内,然后根据精子形成的不同阶段,分别丁注射后7、16、30和42天与发情母鼠合笼,利川PCR和DNA印迹方法对新生小鼠进行基因组DNA检测.在各阶段所得新生小鼠中PCR 阳性率分别为6.82%、0、56.86%和42.86%,DNA印迹检测阳性率分别为6.82%、0、47.06%、34.69%.经活体荧光成像系统及荧光显微镜分析,转基因小鼠呈现绿色荧光表达.通过比较精子生成各阶段转基因效率高低,为以后通过用睾丸内注射法转染雄性生殖细胞高效制作转基国动物提供了理论依据.
재과거적근30년중,전기인기술재포유동물기인표체방면연구적응용이경성위실험생물학급응용생물학영역최위현저적진전지일.전통적제작전기인동물방법유현미주사법、역전록병독감염법화배태간세포현등,단매충방법도유기결함,한제료기재금후전기인동물연구중적엄범심용.대소서체내생식세포진행외원기인전염,연구정자형성과정중제작전기인소서적효솔.수선운용고환주사법장피지질체포과적록색형광단백표체재체(pIRES2-EGFP)주사도공서고환급부고내,연후근거정자형성적불동계단,분별정주사후7、16、30화42천여발정모서합롱,리천PCR화DNA인적방법대신생소서진행기인조DNA검측.재각계단소득신생소서중PCR 양성솔분별위6.82%、0、56.86%화42.86%,DNA인적검측양성솔분별위6.82%、0、47.06%、34.69%.경활체형광성상계통급형광현미경분석,전기인소서정현록색형광표체.통과비교정자생성각계단전기인효솔고저,위이후통과용고환내주사법전염웅성생식세포고효제작전기국동물제공료이론의거.