北方园艺
北方園藝
북방완예
NORTHERN HORTICULTURE
2011年
2期
139-143
,共5页
谭江平%曾秀丽%廖明安%邱利娜%王玉霞%次仁卓嘎
譚江平%曾秀麗%廖明安%邱利娜%王玉霞%次仁卓嘎
담강평%증수려%료명안%구리나%왕옥하%차인탁알
光核桃%SRAP%正交设计%体系优化%引物筛选
光覈桃%SRAP%正交設計%體繫優化%引物篩選
광핵도%SRAP%정교설계%체계우화%인물사선
以西藏12份光核桃种质为试材,采用正交设计,从dNTPs、Mg2+、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶5种因素5个水平来优化SRAP-PCR反应体系,并对引物进行了筛选.结果表明:光核桃25 μL的SRAP反应体系的最佳组分包括2.5 μL 10×buffer,0.35 mmol/L dNTPs,1.5 mmol/L Mg2+,0.4 μmol/L引物,20 ng模板DNA和2.5 U Taq DNA聚合酶.各因素对扩增反应结果均有不同影响,其中以dNTPs浓度影响最大,模板DNA的影响最小.应用该体系从40个引物组合中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物组合23个.这一体系的建立及多态性引物组合的筛选为利用SRAP标记技术进行光核桃遗传多样性研究提供了依据.
以西藏12份光覈桃種質為試材,採用正交設計,從dNTPs、Mg2+、引物、模闆DNA和Taq DNA聚閤酶5種因素5箇水平來優化SRAP-PCR反應體繫,併對引物進行瞭篩選.結果錶明:光覈桃25 μL的SRAP反應體繫的最佳組分包括2.5 μL 10×buffer,0.35 mmol/L dNTPs,1.5 mmol/L Mg2+,0.4 μmol/L引物,20 ng模闆DNA和2.5 U Taq DNA聚閤酶.各因素對擴增反應結果均有不同影響,其中以dNTPs濃度影響最大,模闆DNA的影響最小.應用該體繫從40箇引物組閤中共篩選齣擴增條帶清晰、多態性豐富的SRAP引物組閤23箇.這一體繫的建立及多態性引物組閤的篩選為利用SRAP標記技術進行光覈桃遺傳多樣性研究提供瞭依據.
이서장12빈광핵도충질위시재,채용정교설계,종dNTPs、Mg2+、인물、모판DNA화Taq DNA취합매5충인소5개수평래우화SRAP-PCR반응체계,병대인물진행료사선.결과표명:광핵도25 μL적SRAP반응체계적최가조분포괄2.5 μL 10×buffer,0.35 mmol/L dNTPs,1.5 mmol/L Mg2+,0.4 μmol/L인물,20 ng모판DNA화2.5 U Taq DNA취합매.각인소대확증반응결과균유불동영향,기중이dNTPs농도영향최대,모판DNA적영향최소.응용해체계종40개인물조합중공사선출확증조대청석、다태성봉부적SRAP인물조합23개.저일체계적건립급다태성인물조합적사선위이용SRAP표기기술진행광핵도유전다양성연구제공료의거.
