重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2011年
7期
800-804
,共5页
重组大肠杆菌%硫酸基转移酶%多氯联苯%羟基多氯联苯
重組大腸桿菌%硫痠基轉移酶%多氯聯苯%羥基多氯聯苯
중조대장간균%류산기전이매%다록련분%간기다록련분
目的:多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)是一类持久性环境污染物,对人类健康有潜在危害.羟基多氯联苯(Hydroxylated PCBs,OH-PCBs)是PCBs在体内的生物活性形式;已有报道OH-PCBs是多种亚型的酚类硫酸基转移酶(Sulfotransferases,SULTs)抑制剂和底物,本研究拟观察OH-PCBs与人和大鼠羟基固醇类SULT有无相互作用.方法:采用重组表达人羟基固醇类SULT (SULT2A1)和其大鼠同源酶SULT2A3的大肠杆菌菌株,分离纯化所表达的酶蛋白;分析3种OH-PCBs的酶促硫酸基结合或抑制生理性底物结合反应的活性;以辅酶转化产物3’,5’-二磷酸腺苷(Adenosine 3’,5’-diphosphate,PAP)形成反映酶促硫酸基结合的水平.结果:4-OH PCB 34和4’-OH PCB 68一定浓度(1~200 μmol/L)对人SULT2A1具有底物活性;二者都存在底物抑制(在50μmol/L以上抑制明显).4’-OH PCB 9对此酶不具底物活性,但对去氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)和1-甲醇基芘的酶促硫酸基结合有抑制作用,且呈竞争性抑制.不同的是3种OH-PCBs对大鼠SULT2A3都不具底物活性,且对该酶作用下以DHEA为底物的反应仅微弱抑制.结论:人和大鼠两个种属的羟基固醇类SULT对OH-PCBs的底物特异性及亲和力存在显著差异,OH-PCBs与人SULT2A 1具有比与大鼠SULT2A3活跃的相互作用.
目的:多氯聯苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)是一類持久性環境汙染物,對人類健康有潛在危害.羥基多氯聯苯(Hydroxylated PCBs,OH-PCBs)是PCBs在體內的生物活性形式;已有報道OH-PCBs是多種亞型的酚類硫痠基轉移酶(Sulfotransferases,SULTs)抑製劑和底物,本研究擬觀察OH-PCBs與人和大鼠羥基固醇類SULT有無相互作用.方法:採用重組錶達人羥基固醇類SULT (SULT2A1)和其大鼠同源酶SULT2A3的大腸桿菌菌株,分離純化所錶達的酶蛋白;分析3種OH-PCBs的酶促硫痠基結閤或抑製生理性底物結閤反應的活性;以輔酶轉化產物3’,5’-二燐痠腺苷(Adenosine 3’,5’-diphosphate,PAP)形成反映酶促硫痠基結閤的水平.結果:4-OH PCB 34和4’-OH PCB 68一定濃度(1~200 μmol/L)對人SULT2A1具有底物活性;二者都存在底物抑製(在50μmol/L以上抑製明顯).4’-OH PCB 9對此酶不具底物活性,但對去氫錶雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)和1-甲醇基芘的酶促硫痠基結閤有抑製作用,且呈競爭性抑製.不同的是3種OH-PCBs對大鼠SULT2A3都不具底物活性,且對該酶作用下以DHEA為底物的反應僅微弱抑製.結論:人和大鼠兩箇種屬的羥基固醇類SULT對OH-PCBs的底物特異性及親和力存在顯著差異,OH-PCBs與人SULT2A 1具有比與大鼠SULT2A3活躍的相互作用.
목적:다록련분(Polychlorinated biphenyls,PCBs)시일류지구성배경오염물,대인류건강유잠재위해.간기다록련분(Hydroxylated PCBs,OH-PCBs)시PCBs재체내적생물활성형식;이유보도OH-PCBs시다충아형적분류류산기전이매(Sulfotransferases,SULTs)억제제화저물,본연구의관찰OH-PCBs여인화대서간기고순류SULT유무상호작용.방법:채용중조표체인간기고순류SULT (SULT2A1)화기대서동원매SULT2A3적대장간균균주,분리순화소표체적매단백;분석3충OH-PCBs적매촉류산기결합혹억제생이성저물결합반응적활성;이보매전화산물3’,5’-이린산선감(Adenosine 3’,5’-diphosphate,PAP)형성반영매촉류산기결합적수평.결과:4-OH PCB 34화4’-OH PCB 68일정농도(1~200 μmol/L)대인SULT2A1구유저물활성;이자도존재저물억제(재50μmol/L이상억제명현).4’-OH PCB 9대차매불구저물활성,단대거경표웅동(Dehydroepiandrosterone,DHEA)화1-갑순기비적매촉류산기결합유억제작용,차정경쟁성억제.불동적시3충OH-PCBs대대서SULT2A3도불구저물활성,차대해매작용하이DHEA위저물적반응부미약억제.결론:인화대서량개충속적간기고순류SULT대OH-PCBs적저물특이성급친화력존재현저차이,OH-PCBs여인SULT2A 1구유비여대서SULT2A3활약적상호작용.